[发明专利]四糖MAG拮抗剂的合成方法

权利要求书

1.四糖MAG拮抗剂的合成方法，其特征在于：所述步骤如下：

（1）利用化学法合成β-构型的N-乙酰半乳糖胺，结构如通式Ⅰ所示，其中：R¹为氢原子、α-或β-构型丝氨酸残基、α-或β-构型苏氨酸残基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基或α-或β-构型取代烷基；

（2）利用“一锅双酶法”将通式Ⅰ和半乳糖立体选择性偶联合成二糖Galβ(l-3)GalNAcOR¹，结构如通式Ⅱ所示，所述“一锅双酶法”中先后用到的酶分别为半乳糖激酶和己糖磷酸化酶；其中：R¹为氢原子、α-或β-构型丝氨酸残基、α-或β-构型苏氨酸残基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基或α-或β-构型取代烷基；

（3）利用“一锅双酶法”合成三糖，结构如通式Ⅲ所示，所述“一锅双酶法”唾液酸化中用到的酶指CMP-唾液酸合成酶和α2,3唾液酸转移酶；其中：R¹为氢原子、α-或β-构型丝氨酸残基、α-或β-构型苏氨酸残基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基或α-或β-构型取代烷基；R²为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；R³为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；

（4）利用乙酰化和选择性脱乙酰基的方法，合成含唾液酸衍生物的内酯三糖，结构如通式Ⅳ所示；其中：R¹为氢原子、α-或β-构型丝氨酸残基、α-或β-构型苏氨酸残基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基或α-或β-构型取代烷基；R²为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；R³为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；

（5）利用酶法合成内酯四糖，所述酶法唾液酸化中用到的酶指α2,6唾液酸转移酶，结构如通式Ⅴ所示；其中：R¹为氢原子、α-或β-构型丝氨酸残基、α-或β-构型苏氨酸残基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基或α-或β-构型取代烷基；R²为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；R³为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；R⁴为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；R⁵为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；

（6）碱性水溶液中水解上述双唾液酸化四糖的内酯，得到四糖MAG拮抗剂，结构如通式Ⅵ所示；其中：R¹为氢原子、α-或β-构型丝氨酸残基、α-或β-构型苏氨酸残基、叠氮取代烷基、炔基取代烷基、巯基取代烷基或α-或β-构型取代烷基；R²为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；R³为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；R⁴为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮；R⁵为氟原子、氮乙酰氨基、氮羟基乙酰氨基、氮叠氮乙酰氨基、羟基或叠氮。

2.根据权利要求1所述的四糖MAG拮抗剂的合成方法，其特征在于：所述步骤（1）中的β-构型的N-乙酰半乳糖胺采用以下方法合成：将半乳糖氨盐酸盐与醋酐进行反应后，将其全部羟基用乙酰基保护；然后在微波条件下进行β-构型糖苷化反应，然后依次叠氮化和脱保护后即得。

3.根据权利要求1所述的四糖MAG拮抗剂的合成方法，其特征在于：所述步骤（2）中的二糖Galβ(l-3)GalNAcΟR¹合成方法是：将化合物Ⅰ、半乳糖(1.5-3.0当量)、腺嘌呤核苷三磷酸(1.5-5.0当量)、MgCl₂(5-100mmol)、Tris-HCl缓冲液(10-500mmol,pH5.0-10.0)配制水溶液，然后将反应体系的pH值调节至4.5-8.5，然后添加半乳糖激酶和己糖磷酸化酶，待反应完成后，纯化即可直接获得二糖化合物Ⅱ。