[发明专利]人参皂甙Rg1在制备抗内毒素作用于Toll样受体4药物上的应用

说明书

技术领域

本发明涉及人参皂甙Rg1的用途，特别是用于制备抵抗内毒素作用于Toll样受体4上的药物。

背景技术

细菌内毒素（endotoxin）是革兰氏阴性菌裂解时释放出来的细胞壁脂多糖成分lipopolysaccharide（LPS），是导致人和动物脓毒症或感染性休克的主要致病因素[1]。国外流行病学调查显示，每年全球的脓毒症患者超过1800万例，美国约75万例，欧美每年死于此病的人数超过35万，是ICU病房最常见的死因[2,3]。我国目前尚缺乏详细的流行病学资料。据推算，每年至少有300万个病例，因此病而死亡的人数在100万以上[3]。动物感染革兰氏阴性菌也极其普遍，可见于猪、牛、羊、马、鹿、麝、狐、骆驼、水貂、大熊猫等各种动物。虽然不同动物临床症状不尽相同，但都可以表现为内毒素引起的急性炎症反应。例如，奶牛大肠杆菌引起的超急性乳房炎（peracute mastitis）。病牛可出现乳房局部和全身的急性炎性症状，表现为乳房和乳头局部红、肿、热、痛，挤不出牛奶，全身体温升高，精神萎靡，食欲减退或废绝[4，5]。如不及时抢救可引起病牛死亡，或患病乳腺组织受到严重破坏，导致瞎奶头，造成严重的经济损失[4]。

近年来对细菌内毒素引起炎症反应的病理机制进行了大量研究。目前认为宿主对侵入机体的病原产生过度免疫反应是导致内毒素性全身炎症反应的主要原因[6]。革兰氏阴性细菌死亡时裂解、释放出LPS，血液中的脂多糖结合蛋白LBP和LPS结合，将LPS传递给巨噬细胞表面的CD14，形成CD14-LPS[7]。巨噬细胞膜上的髓样分化蛋白-2（MD-2）和Toll样受体4（TLR4）结合形成MD2-TLR4具有模式识别作用[7,8,9]。TLR4识别LPS之后形成TLR4-MD2-LPS复合物，TLR4的立体构象发生改变，其胞内部分的TIR结构域通过同型互作与衔接蛋白MyD88作用启动信号转导，或与非MyD88依赖的衔接蛋白TRAM和TRIF作用激活NF-кB，诱导巨噬细胞合成和分泌IL-1，IL-6，IFN-β和TNF-α等细胞因子，它们进入血液循环到达下丘脑后作用于体温调节中枢，使调定点上移，引起机体发热[10]。这些释放到细胞外的细胞因子还引起粒细胞、巨噬细胞趋化聚集,毛细血管通透性增高，淋巴细胞浸润等炎症反应。LPS持续刺激的另一个后果是Th1类细胞因子（TNF-α,IFN-γ）分泌减少，Th2类细胞因子（IL-4、IL-10）增加，T细胞对特异性抗原的刺激无应答，引起免疫麻痹，免疫系统清除病原的机能丧失[11]。

目前对细菌内毒素引起的炎症反应的治疗主要采用抗生素控制感染源和糖皮质激素抑制炎症因子的产生[12]。但研究发现抗生素治疗可诱导内毒素血症的产生，其原因是抗生素治疗后引起大量的细菌死亡，释放出LPS，使循环中的LPS增加，加重全身性炎症反应[13]；糖皮质激素可抑制机体的免疫系统，不利于细菌感染的清楚。由于细菌内毒素致病极其普遍，世界各大制药公司竞相研发抗内毒素药物。其中一个思路是采用TLR4拮抗剂通过阻断TLR4信号通路抑制LPS引起的炎症反应。Eritoran（E5564）和TAK-242就是这类药物的代表。E5564是Eisai制药公司开发的化合物，结构上类似于内毒素中的类脂A。E5564在体外和MD-2分子的疏水区结合，竞争性阻止内毒素中类脂A结合到该部位，进而阻断LPS的致炎作用[14,7]；TAK-242是Takeda制药公司开发的环己烯衍生物,它能选择性地结合在TLR4的胞内区TIR结构域，通过抑制TRAM的磷酸化阻断TLR4信号转导[7]。动物试验表明，E5564和TAK-242可以显著抑制LPS诱导的内毒素血症的发生，并已通过I期和II期临床试验[7]，但由于它们对严重的毒血症患者没有显著治疗效果，未通过III期临床试验[7]。因此，目前临床上尚无针对细菌内毒素的特异性治疗药物。

人参皂甙Rg1，英文名Ginsenoside Rg1，其具有促进海马神经发生、提高神经可塑性、增强学习、记忆力、抗衰老、抗疲劳、提高免疫力、辅助抗肿瘤、修复性功能等作用，在高端保健、辅助抗肿瘤、防治老年痴呆等神经退行性疾病方面具有广阔的应用前景。

熊俊等作者于2006年发表的《人参皂甙Rg1对内毒素性肺损伤血管通透性的影响》一文中推测Rg1降低实验性LPS引起的大鼠肺水肿是通过抗氧化作用和维持细胞膜的稳定性；在给药方法上，为采取在注射LPS的同时注射Rg1。

上文中涉及的参考文献具体如下：

[1]田金飞,汤彦,十堰.脓毒血症研究进展.内科急危重症杂志,2012,18(1):14-16；