[发明专利]一种碱性过氧化氢酶高产菌及该菌株发酵法生产工艺有效
申请号: | 201310505522.2 | 申请日: | 2013-10-24 |
公开(公告)号: | CN103555620A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | 刘焕民;周颖;王建;张峰 | 申请(专利权)人: | 常州大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/08;C12R1/06 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 213164 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 碱性 过氧化氢酶 高产 菌株 发酵 生产工艺 | ||
1.碱性过氧化氢酶高产菌,经鉴定其属于节杆菌Arthrobacter sp.,保藏编号为CGMCC NO.8181。
2.权利要求1所述的碱性过氧化氢酶高产菌生产碱性过氧化氢酶的方法,按照下述步骤进行:
采用CGMCC NO:8181为出发菌株,经种子培养和液体深层发酵制得碱性过氧化氢酶,
种子培养基是LB培养基:以g/L计,葡萄糖20,蛋白胨10,牛肉浸膏5,氯化钠5,pH 7.2;培养条件:培养时间为12~16小时,温度为29~32℃,摇床转速为160 转/分钟;
发酵培养基是LB培养基:以g/L计,木薯淀粉15~20,豆粕粉50~70,磷酸二氢钾 0.5,初始pH为7.0;发酵条件:发酵时间为35~45小时,接种量为1%~8%(v/v),装液量为40ml/250 ml,培养温度为30~40℃,摇床转速为200~250 转/分钟;
取15ml发酵液,12000 转/分钟离心20分钟,然后加入15ml磷酸缓冲液混匀后,超声波破碎取,12000 转/分钟离心15分钟,取上清液得到碱性过氧化氢酶。
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