[发明专利]一种竹叶中多酚的提取和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术，具体地说是涉及一种竹叶中多酚的提取和检测方法。

背景技术

多酚是植物中具有促进人体健康功效的化合物；存在于一些常见的植物性食物中，如可可豆，茶，大豆，红酒，蔬菜和水果。多酚类物质具有很强的抗氧化作用。氧化损伤是导致许多慢性病，如心血管病，癌症和衰老的重要原因。多酚的抗氧化功能可以对这些慢性病起到预防作用。比如巧克力中的多酚是很强的抗氧化剂，它可以抑制低密度脂蛋白（LDL）胆固醇氧化。多酚除了具有抗氧化作用外，据2008年1月FEDERATION of AMERICAN SOCIETIES for EXPERIMENTAL BIOLOGY(FASEB)杂志报道，以色列研究人员首次发现在进食高脂食物的同时摄入多酚可以减轻高脂食物对人体健康的威胁，这说明多酚可以有效预防高脂食物在人体代谢过程中所产生的衍生物，如自由基的危害性。

尽管多酚广泛存在于植物性食物中，但是它在不同植物中的活性成分物质及其结构、含量有很大差异。而且，植物中多酚的含量受诸多因素影响，如品种、加工过程及储存条件等。

竹叶是中医一味传统的清热解毒药，被中华人民共和国卫生部批准列入药-食两用天然植物,对人类第一杀手心脑血管疾病的防治具有一定的作用；国珍竹康宁就是以竹叶为主要原料。竹叶提取物具有良好的抗自由基氧化能力；其抗衰老，抗疲劳和免疫调节作用与松花粉相当；降血脂和血胆固醇作用与银杏叶提取物相近；抗菌，消炎和抗病毒作用与茶多酚相似，可有效保护人体健康。现代医学研究表明：竹叶多酚除了和其它植物多酚，如茶多酚、银杏多酚一样具有清除体内自由基、消除疲劳、调节机体免疫力、抗衰老、保护肝脏、调节血脂、防治心血管病等功效外；竹叶多酚还能抑菌消炎、促进表皮细胞增殖、修复皮肤损伤、抑制黑色素合成、消斑美白，具有类似SOD的活性，是一种优良的天然医药保健品、卫生防护品及食品添加剂。目前对竹叶多酚研究的报道较少，对此，我们对竹叶多酚的提取和检测方法进行了详细的研究，为竹叶的开发利用提供理论依据。

目前竹叶多酚的提取一般采用有机溶剂法进行提取。通常单纯利用有机溶剂浸提多酚的效率比较低；利用微波炉辅助有机溶剂浸提可以提高多酚的提取效率，但是微波炉的功率较难把握，功率太低达不到加热提取的效果，功率较高则物料的温度会瞬间升高，容易导致茶多酚氧化损失，降低提取率。此外，超声波也被引入多酚的提取，但通常都在高温下进行，由于多酚的热稳定性不好，容易导致多酚发生氧化损失，部分活性成分遭受破坏。

此外，目前竹叶中多酚含量的检测一般参考茶叶中多酚含量的国标分析方法（GB/T8313,酒石酸铁比色法）。但是每种植物的多酚中所含的活性物质类型、及其化学结构和含量都有较大差异，如果直接参考茶叶多酚的测量方法用于竹叶可能产生较大误差。因此本专利针对竹叶多酚系统地研究相应的测量方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，提供一种竹叶中多酚的提取和检测方法，该方法提取效率高，检测方便。本发明的目的在于：优化并建立检测新鲜竹叶中多酚含量的体系，以及提取竹叶中多酚的体系。

相比较于现有的竹叶多酚提取方法，本发明中竹叶的保存、处理及提取过程均在低温进行，可以有效保护多酚中活性物质；并且直接采用丙酮作为提取溶剂可有效提高多酚提取效率；之外，超声波的利用可以进一步提高提取效率。

为实现本发明的目的，本发明采用的技术方案如下：

一种竹叶中多酚的提取和检测方法，该方法的步骤为：

（1）备料：选取新鲜竹叶，液氮冷冻后于-70℃保存，备用；

（2）超声波辅助丙酮低温提取竹叶中多酚：提取时，取出一定量竹叶置于研钵中，加入液氮研碎，选取丙酮作提取溶剂，向竹叶中加入丙酮，收集到离心管中，于10℃以下低温超声提取15～90min，离心取上清，即得竹叶多酚提取液。

（3）竹叶中多酚的检测：

Folin-ciocalteu法检测：新鲜竹叶中多酚检测体系为：多酚提取液0.04mL、水1.96mL、稀释2～6倍的Folin-ciocalteu显色剂1mL、5%～25%Na₂CO₃1mL；

检测条件：反应温度：水浴25～35℃，反应时间：0.5～4h，检测波长：750nm～775nm。

进一步，步骤（2）中，选取30%丙酮作提取溶剂，按1g竹叶样品加入5～25mL的比例取用30%丙酮，收集到50mL离心管中，于10℃以下低温超声提取15～90min，离心取上清，即得竹叶多酚提取液。