[发明专利]一种从油菜花粉和油菜蜂花粉中提取分离核苷的方法及其抗前列腺增生的应用

说明书

技术领域

本发明涉及食品，保健食品，医药技术领域，是指一种从油菜花粉和油菜花粉中中提取分离核苷的方法及其抗前列腺增生应用。

背景技术

油菜花粉是油料作物油菜(Brassica campestris L.)的花粉，油菜蜂花粉(bee pollen)是蜜蜂从油菜植物的花药内采集的花粉球。大量文献报道油菜花粉和油菜蜂花粉具有延缓衰老、降低血清胆固醇、提高免疫、抑制前列腺增生和抗前列腺炎的作用，特别是对前列腺增生和前列腺炎具有显著的治疗作用。有关油菜花粉和油菜蜂花粉中的化学成分已有很多报道，但在本发明之前何种成分是抑制前列腺增生和抗前列腺炎的功能成分并不清楚，这严重限制了油菜花粉和油菜蜂花粉的开发利用。我们对油菜花粉和油菜蜂花粉中抑制前列腺增生和抗前列腺炎的功能成分进行不懈努力，从醇提取物中筛选出Brassicalkaloid为抑制前列腺增生的功能成分，从水提取物中筛选出核苷为水提取物中抑制前列腺增生的功能成分。

发明内容

本发明为从油菜花粉和油菜蜂花粉中提取分离核苷的方法及其抗前列腺增生应用。为达上述目的，本发明依次采用如步骤：

1材料：油菜(Brassica campestris L.)的花粉，油菜蜂花粉(bee pollen)是蜜蜂从油菜植物的花药内采集的花粉球。

2、有效成分的提取：

①提取：将油菜花粉或油菜蜂花粉粉碎，过60目，取筛下粉体，按料液比(W／V)1：8～10加入60～90％的乙醇室温提取2～4小时，过滤，滤渣再用60～90％的乙醇重复提取一次，取滤渣按料液比(W／V)1：10加入去离子水，40～70℃提取2～4小时，过滤取滤液，减压浓缩到十分之一体积，通过大孔树脂柱AB-8或X-5，用水，5％，10％，90％乙醇洗脱，收集10％乙醇洗脱液并减压浓缩，得大孔树脂10％乙醇脱物。

②分离：将大孔树脂10％乙醇洗脱物上MCI柱层析，用水，10％，20％，90％乙醇洗脱，用薄层层析法检测，收集含核苷的洗脱液，浓缩得核苷提取物，提取物中总核苷含量大于90％。

③核苷提取物的功效成分组成为：

3抗前列腺增生的应用

表1.核苷提取物对丙酸睾丸素所致小鼠前列腺增生的抑制效果

n=10；*表示与模型组相比有明显差异，P<0.05；**表示与模型组相比有非常明显差异，P<0 01；***表示差异极度明显，P<0.001

以上结果显示，与模型组相比，核苷提取物在200mg／kg剂量时前列腺湿重，前列腺指数和前列腺酸性磷酸酶(PAP)三个指标有显著的抑制作用，核苷提取物在400mg／kg剂量时三个指标有非常显著的抑制作用。表明核苷提取物具有抑制前列腺增生的作用。

附图1鸟嘌呤核苷的碳谱

附图2腺嘌呤核苷的碳谱

附图3胸腺嘧啶脱氧核苷的碳谱

实施例1

取5kg油菜蜂花粉，粉碎，过60目，取筛下粉体，筛上物再次粉碎过60目，取筛下粉体，将筛下粉体置于50升提取罐中，加40升70％乙醇，室温提取3小时，过滤，渣再重复提取一次，过滤，取滤渣置于100升提取罐中，再加入50升去离子水，60℃提取3小时，过滤，取滤液，得滤液49.8升，减压浓缩至5升，然后通过大孔树脂柱AB-8(10×150cm)柱，先用20升去离子水洗脱，再用10升5％乙醇洗脱，然后用20升10％乙醇洗脱、后用90％乙醇洗脱，收集10％乙醇洗脱液并减压浓缩，得浓缩物约2升。将2升大孔树脂10％乙醇洗脱浓缩物上MCI柱层析(5×150cm)，分别用5升去离子水洗脱、5升10％、5升20％乙醇洗脱，用薄层层析法检测，收集含核苷的洗脱液，得核苷提取物28.9克。

以上较佳实施例仅用于说明本发明的内容，除此之外，本发明还有其他实施方式，但凡本领域技术人员因本发明所涉及之技术启示，而采用等同替换或等效变形方式形成的技术方案均落在本发明的保护范围内。