[发明专利]一株猪肺炎支原体菌株

说明书

技术领域

本发明涉及一株猪肺炎支原体菌株。

背景技术

猪支原体肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine，MPS），又称猪气喘病或猪地方流行性肺炎，MPS是一种慢性、接触性、非致命性的呼吸系统疾病，国内发病率达80%以上，该病即可影响猪群生产性能和增重及饲料报酬，又可继发感染其它传染病，是养猪业重点控制的传染病之一。猪支原体肺炎的病原体是猪肺炎支原体（Mycopasma hyopneumoniae，Mhp），可通过病猪与健康猪直接接触或通过气溶胶传播，一般传播距离可达到4.7km，最新研究发现其传播距离可远至9.2km，因此，Mhp极难防控。猪感染Mhp后会出现呼吸困难、机体消瘦、免疫抑制等。

猪肺炎支原体是软皮纲、支原体目、支原体科、支原体属、猪肺炎支原体种。Mhp无细胞壁，具有高度多形性，大小不等，在液体培养物和肺触片中常呈球状，直径约0.2-0.5μm，并由小球状串连成环状，直径约0.8-20μm，偶有新月状、长链状和丝状。猪肺炎支原体体外培养对生长条件要求苛刻，营养要求高且生长速度缓慢，分离过程中受猪的其他支原体（如猪鼻支原体）的影响，导致猪肺炎支原体分离筛选难度较大。

发明内容

本发明目的是提供一株猪肺炎支原体菌株。

一株猪肺炎支原体菌株，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.8096，保藏日期为2013年8月15日，保藏地址为北京市朝阳区北辰路1号院3号，它命名为猪肺炎支原体（Mycopasma hyopneumoniae）HDZK-Mhp57。

猪肺炎支原体（Mycopasma hyopneumoniae）HDZK-Mhp57，它的菌落形态为典型的支原体煎荷包蛋形菌落；生理生化特征：葡萄糖反应阳性、甘露糖反应阳性、精氨酸反应阴性、尿素酶反应阴性、抗血清抑制生长实验阳性、荧光抗体实验为阳性。

猪肺炎支原体（Mycopasma hyopneumoniae）HDZK-Mhp57的分子生物学鉴定结果：其16S rRNA序列与NCBI中公布的相近种属的猪肺炎支原体HN0613的同源性为98%，为一新支原体菌株。

本发明一株猪肺炎支原体菌株，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.8096，保藏日期为2013年8月15日，保藏地址为北京市朝阳区北辰路1号院3号，它命名为猪肺炎支原体（Mycopasma hyopneumoniae）HDZK-Mhp57。

本发明中猪肺炎支原体（Mycopasma hyopneumoniae）HDZK-Mhp57，制备的无细胞培养基中活菌滴度高达1012CCU/mL；免疫原性好，肺炎病变减少率可达90%以上，可大大降低兽用生物制品的生成成本。猪肺炎支原体（Mycopasma hyopneumoniae）HDZK-Mhp57可用于制备成预防用兽用生物制品或兽药，为研制猪支原体肺炎灭活疫苗、基因工程疫苗和猪肺炎支原体诊断试剂盒奠定了基础。

附图说明

图1为具体实施方式中的荧光抗体试验结果图。

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式一株猪肺炎支原体菌株，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.8096，保藏日期为2013年8月15日，保藏地址为北京市朝阳区北辰路1号院3号，它命名为猪肺炎支原体（Mycopasma hyopneumoniae）HDZK-Mhp57。

本实施方式中一株猪肺炎支原体菌株，它的分离过程如下：

一、取支原体肺炎病变肺脏，在超净台内用无菌手术剪刀剪取发病部位边缘组织，放入无菌平皿，将病变肺脏组织剪成小块，接种Friis肉汤，37℃培养至培养液变色；

二、培养液变色后，取0.5mL经0.45μm滤器过滤的培养物加入到1.5mL加了青霉素的Friis肉汤培养液中，37℃培养；

三、每隔一周传代一次，前两周要在培养液中加入50%的猪鼻支原体特异性血清，传至第九周对培养物进行稀释涂板，筛选单落，重复三次后保存菌株。

鉴定按以下步骤：

一、镜检

Friis平板接种培养物，37℃培养；挑取单菌落涂片，分别进行革兰氏染色和瑞氏染色，镜检；

结果：

病变组织接种到Friis培养液中，6d后培养液变色；过滤接种后在5-6d后培养液变为黄色；接种到平板37℃培养6-7d后出现典型的支原体煎荷包蛋形菌落。