[发明专利]番茄SlEBI基因及其RNAi表达载体和应用

权利要求书

1.番茄SlEBI基因，其特征在于：核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

2.番茄SlEBI基因核心片段，其特征在于：核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。

3.权利要求2所述番茄SlEBI基因核心片段在培育多花高产番茄品种中的应用。

4.权利要求2所述番茄SlEBI基因核心片段在培育花柄无离区番茄品种中的应用。

5.含有权利要求2所述SlEBI基因核心片段的RNAi表达载体。

6.根据权利要求5所述的RNAi表达载体，其特征在于：所述RNAi表达载体是以pBin19载体为骨架载体，在多克隆酶切位点处插入顺序连接CaMV35S启动子、番茄SlEBI基因核心片段的反向序列、PDK内含子、番茄SlEBI基因核心片段正向序列和Nos终止子的表达框。

7.含有权利要求5或6所述RNAi表达载体的微生物转化体。

8.权利要求5所述RNAi表达载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

a.以含SEQ ID No.6的重组质粒为模板，以SEQ ID No.4和SEQ ID No.5为引物进行PCR扩增，将扩增产物纯化后用Cla I和Xba I双酶切，再与经同样双酶切的pHANNIBAL载体连接，获得重组质粒pHANNIBAL::SlEBI(1)；

b.按步骤a的方法进行PCR扩增，将扩增产物纯化后用Kpn I和Xho I双酶切，再与经同样双酶切的重组质粒pHANNIBAL::SlEBI(1)连接，获得重组质粒pHANNIBAL::SlEBI(2)；

c.将步骤b所得重组质粒pHANNIBAL::SlEBI(2)用Sac I和Spe I双酶切，再与经Sac I和Xba I双酶切的pBin19载体连接，得RNAi表达载体。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述含SEQ ID No.6的重组质粒由如下方法制备，以含SlEBI基因的重组质粒为模板，以SEQ ID No.4和SEQ ID No.5为引物进行扩增，将扩增产物与pGEM-T Easy载体连接，得含SEQ ID No.6的重组质粒。

10.权利要求5或6所述RNAi表达载体在培育多花高产番茄品种中的应用。