[发明专利]3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯电化学免疫传感器的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于电化学免疫传感器技术领域，特别涉及一种3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯电化学免疫传感器的制备方法。

背景技术

席夫碱化合物用于分析测试已有许多报道，但是双席夫碱做为电活性物质在分析化学中的应用研究则相对地较少，考虑到双席夫碱配合物中较多的配位点，有望成为良好的修饰电极中配合物修饰剂。利用石墨烯和氧化石墨烯独特的电学性质对一些材料进行修饰以及制备性能更好的复合新材料是当前的研究热点，采用石墨烯和氧化石墨烯与一些材料进行复合，复合后具有很好的导电性及生物相容性，在化学传感器的制备及应用中有着广泛的前景。本发明制备了3,5-二溴水杨醛双席夫碱镍配合物，将此双席夫碱镍配合物与氧化石墨烯结合研制了电化学免疫传感器，利用循环伏安法和交流阻抗法对免疫传感器制备过程进行电化学性表征，目前未见文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯电化学免疫传感器的制备方法。

具体步骤为：

(1)取10毫克氧化石墨烯和0.05毫摩尔3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物溶于DMF即N,N-二甲基甲酰胺中，超声分散2小时制得3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯悬浮液。

(2)将金电极在放有Al₂O₃粉末的麂皮上抛光后用二次水淋洗，再依次在无水乙醇和二次水中分别超声清洗3分钟，红外烘干，然后在金电极上滴加步骤(1)制得的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯悬浮液，经红外烘干，制得3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯修饰金电极，记为L1电极。

(3)滴加10微升浓度为 1.0毫克/毫升的EDAC即1-（3-二甲氨基丙烷）-3-乙基碳二亚胺与NHS即羟基琥珀酰亚胺的混合溶液到步骤(2)制得的L1电极上，水平放置2小时，得到活化的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯修饰金电极，记为L2电极，置于4℃的冰箱中保存待用。

(4)用10微升浓度为1.0毫克/毫升的h-IgG溶液滴涂在步骤(3)制得的L2电极上，制得固定了h-IgG的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯修饰金电极，记为L3电极，置于4℃的冰箱中保存待用。

(5)在步骤(4)制得的L3电极表面滴加10微升浓度为1毫克/毫升的 BSA即牛血清白蛋白溶液，对L3电极表面的活性位点进行封闭，红外烘干，记为L4电极，置于4℃的冰箱中保存待用，L4电极即为制得的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯电化学免疫传感器。

本发明方法制备电化学免疫传感器具有操作简单和重现性好的优点，且制得的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯电化学免疫传感器综合性能优异。

具体实施方式

实施例:

(1)取10毫克氧化石墨烯和0.05毫摩尔3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物溶于DMF即N,N-二甲基甲酰胺中，超声分散2小时制得3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯悬浮液。

(2)将金电极在放有Al₂O₃粉末的麂皮上抛光后用二次水淋洗，再依次在无水乙醇和二次水中分别超声清洗3分钟，红外烘干，然后在金电极上滴加步骤(1)制得的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯悬浮液，经红外烘干，制得3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯修饰金电极，记为L1电极。

(3)滴加10微升浓度为 1.0毫克/毫升的EDAC即1-（3-二甲氨基丙烷）-3-乙基碳二亚胺与NHS即羟基琥珀酰亚胺的混合溶液到步骤(2)制得的L1电极上，水平放置2小时，得到活化的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯修饰金电极，记为L2电极，置于4℃的冰箱中保存待用。

(4)用10微升浓度为1.0毫克/毫升的h-IgG溶液滴涂在步骤(3)制得的L2电极上，制得固定了h-IgG的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯修饰金电极，记为L3电极，置于4℃的冰箱中保存待用。

(5)在步骤(4)制得的L3电极表面滴加10微升浓度为1毫克/毫升的 BSA即牛血清白蛋白溶液，对L3电极表面的活性位点进行封闭，红外烘干，记为L4电极，置于4℃的冰箱中保存待用，L4电极即为制得的3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯电化学免疫传感器。