[发明专利]血小板源性生长因子受体β检测试剂盒及其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及血小板源性生长因子受体β检测试剂盒及其用途。

背景技术

泌尿系统的微环境情况对于泌尿系统肿瘤的发生和演进具有重要作用。尿液蛋白能够反映泌尿系统的微环境情况，而尿液来源简单方便无损伤，病人容易接受，无不适感，没有禁忌症。因此尿液是一种理想的用于泌尿系统疾病诊断的生物样品。

目前临床上通过检测尿液的各项生化指标来反映泌尿系统功能的改变，协助临床诊疗。但这些指标是不能对泌尿系统肿瘤的发生或发展给予提示。对此，大量的研究集中在尿液中寻找一些疾病相关蛋白标志物，或能够早期灵敏地提示泌尿系统肿瘤的发生并对其预后提供参考。近年来，有文献报道了一些蛋白标志物。然而，由于尿液蛋白的来源十分复杂，并且受环境饮食等因素影响，生理波动十分巨大，从而导致了这些疾病相关蛋白标志物由于特异性和稳定性等问题都没有被临床广泛应用。

发明内容

本发明的目的是为非肌层侵袭性膀胱癌的预后分析提供一种新选择。

本发明的技术方案是血小板源性生长因子受体β检测试剂盒，包含能特异识别尿液中肿瘤蛋白标志物PDGFRB的检测剂和捕捉剂。

具体的，所述的捕捉剂为人PDGFRB蛋白抗体。

进一步的，所述的抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或重组抗体。

具体的，所述的检测剂为可检测的标记物。

进一步的，所述的可检测的标记物成份包括酶、辅基、荧光物质、发光物质、生物发光物质或放射活性物质。

进一步的，所述的酶是辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、beta－半乳糖酶或乙酰胆碱醋酶。

进一步的，所述的辅基为链霉菌抗生物素蛋白/生物素蛋白或抗生物素蛋白/生物素蛋白。

进一步的，所述的荧光物质为伞形酮、荧光素、荧光素异硫氰酸醋、若丹明、丹磺酰氯或藻红蛋白。

进一步的，所述的发光物质为发光氨。

进一步的，所述的生物发光物质为荧光素酶、荧光素或水母发光蛋白。

进一步的，所述的放射活性物质为¹²⁵I、³⁵S、¹⁴C、³H或⁵²Mg。

本发明还提供了所述试剂盒在非肌层侵袭性膀胱癌预后分析中的用途。

上述捕捉剂可以和PDGFRB蛋白分装，也可以偶联。

本发明的检测样品为非肌层侵袭性膀胱癌患者的尿液；上述检测试剂盒还含有必要的检测所需的稀释试剂或缓冲试剂，及用作诊断标准用途的特定浓度的PDGFRB蛋白标准品。

上述抗体可通过商业途径获得，还可以通过抗体制备的常规方法来完成，如通过重组方法制备的杭体，如噬菌体展示抗体，从转基因动物（如小鼠）中分离的抗体，用转入宿主细胞的重组表达载体表达的抗体，从重组组合抗体文库中分离的抗体。此外，也可以通过表达和纯化上述人源PDGFRB蛋白，用其免疫动物以获得免疫血清，再用常规的方法纯化血清中的抗体而获得。

制备本发明检测试剂盒，可以通过市场商业途径获得试剂盒中的捕捉剂、和必要的稀释缓冲液，其中本发明的实施例中的捕捉试剂采用的是商业来源的特异抗体，当然也可以按常规抗体制备的方法制备得到。上述试剂盒的各组分只需常规使用，无需特别操作，可以按照各组成试剂使用说明来进行或按照常规实验方法操作，本领域技术人员能够结合样品的特点正确使用检测试剂盒。

上述PDGFRB蛋白的识别检测载体不限于试剂盒的方式，其它检测载体如蛋白芯片、检测试纸等也可以被用来检测上述蛋白标志物。

上述PDGFRB蛋白具有制备用于非肌层侵袭性膀胱癌预后分析的特异抗体的用途，利用其特异抗体可以制备用于非肌层侵袭性膀胱癌预后判断的试剂盒、蛋白芯片或检测试纸等检测产品。

本发明通过对大规模健康人群尿液进行蛋白质组学系统分析、GO分析，肿瘤相关蛋白间相互作用（PPI）网络分析，并通过酶联免疫吸附试验验证，最终寻找到了PDGFRB作为非肌层侵袭性膀胱癌复发的标志蛋白。本发明的PDGFRB检测试剂盒将会对临床判断膀胱癌患者的预后具有重要作用，肌层侵袭性膀胱癌的预后分析提供一种新选择，并将产生极大的市场价值。本发明利用生物化学试验来分析非肌层侵袭性膀胱癌患者尿液中的PDGFRB蛋白标志物，达到预存膀胱癌复发可能性的目的，检测方法独特，特异性高，因此具有极大的市场前景。

附图说明