[发明专利]抗菌肽Protegrin-1在防治猪蓝耳病中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及抗菌肽Protegrin-1在防治猪蓝耳病中的应用。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS）又称猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome viruse, PRRSV）引起。该病最早于1987年在美国爆发，随后蔓延到欧洲，我国于1996年分离到该病毒。目前，根据基因组序列和抗原性差异，将PRRSV分为两种基因型，一种以Lelystad Virus (LV) 毒株为代表的欧洲型，另一种以ATCC VR-2332毒株为代表的美洲型。在我国，PRRSV主要以美洲型为主，但据报道也分离到欧洲型毒株。2006年，我国爆发了猪高热病，对养猪业造成严重的经济损失，后来将此毒株定义为高致病型毒株（Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome viruse, HP-PRRSV）。PRRS主要引起妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔及各年龄阶段猪特别是仔猪呼吸道症状，特征性病变为间质性肺炎，死亡率极高，是一种高度接触性的全球性的重要传染病。

PRRSV属于尼多病毒目（Nidovirales）、动脉炎病毒科（Arteriviridae）、动脉炎病毒属（Arterivirus）成员，电镜下观察病毒粒子呈球形或椭圆形，有囊膜。病毒基因组为一条单股正链RNA，全长约为15Kb，含有5′和3′非编码区，中间为10个开放阅读框（open reading frame, ORF）,其中ORF2-7分别翻译病毒糖蛋白（glycoprotein GP）GP2a、GP2b、GP3、GP4、GP5、GP5a、M及N蛋白。其中最重要的是GP5和N蛋白，它们不仅是病毒粒子的主要组成部分，而且在病毒粒子的包装、成熟、免疫逃避及抗体诱导中产生重要的作用。

PRRSV的防控是目前我国乃至世界的难题。PRRSV难于防控主要表现在以下几方面：（1）嗜巨噬细胞性和免疫抑制性疾病，PRRSV主要感染猪的肺泡巨噬细胞（Porcine alveolar macrophages, PAMs）, PAMs是免疫细胞，破坏PAMs，从而破坏机体免疫系统，从而引起免疫抑制；（2）抗原变异性，目前PRRSV变异较快，弱毒疫苗的使用是促使病毒变异的一个原因，疫苗没有交叉保护力；（3）抗体依赖性增强，PRRSV的感染会刺激机体产生抗体，但低效价的抗体不但不能中和病毒，反而对病毒的增殖有促进作用；（4）病毒持续性感染，PRRSV感染后，能够长时间在猪体内检测到病毒血症。（5）混合感染，目前临床上混合感染特别是圆环病毒、副猪嗜血杆菌等与PRRSV的混合感染使PRRSV防控难上加难。

目前PRRSV防控主要有灭活疫苗和弱毒疫苗，临床上用的较多的是弱毒疫苗。其中灭活疫苗有如下缺点：（1）需要大剂量接种或应用浓缩抗原，免疫期短，常需强化接种；（2）不能引起局部免疫，以致细胞免疫的作用弱；（3）产生完全免疫力需要2-3周，不利于紧急预防接种与降低疫苗费用；（4）存在灭活不彻底和散毒的可能。而弱毒疫苗存在毒力返强、重组及潜在感染的危险。故疫苗在防制PRRSV中暴露出越来越多的问题。 

抗菌肽Protegrin-1（PG-1）是从猪白细胞中分离得到的由18个氨基酸残基组成的猪源抗菌肽，二级结构为β-折叠，4个半胱氨酸形成2个二硫键对其二级结构的维持及抗微生物学活性起着非常重要的作用，据报道，这2个二硫键的去除能够显著性地降低PG-1的抗微生物学活性。目前已证明PG-1对革兰氏阴性菌、部分革兰氏阳性菌、真菌以及少数囊膜病毒有抗微生物学活性，其中包括HIV、登革热病毒。PG-1是目前被证明为最具潜力成为抗生素的替代物之一。

猪蓝耳病对养猪业造成严重的经济损失，传染性极强。抗菌肽PG-1对PRRSV病毒是否具有抗病毒作用，至今还未有报道。故本发明使用PG-1研究其对PRRSV的抗病毒作用，以期寻找一种很好的抗PRRSV药物。

发明内容

本发明的目的在于提供抗菌肽Protegrin-1在制备抗PRRSV病毒药物中的应用。

本发明的另一目的在于提供抗菌肽Protegrin-1在制备防治猪蓝耳病药物中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案予以实现：