[发明专利]一种喹啉酮类化合物作为hCBS酶抑制剂的应用有效
| 申请号： | 201310467300.6 | 申请日： | 2013-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN104546849B | 公开（公告）日： | 2018-06-05 |
| 发明（设计）人： | 于晶;吴方;周越洋 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | A61K31/47 | 分类号： | A61K31/47;A61P9/00;A61P9/10;A61P25/00;A61P35/00;C12Q1/527;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酶抑制剂 喹啉酮类 应用 氨基 小分子化合物 唐氏综合症 先导化合物 二氢喹啉 酶促反应 信号通路 治疗循环 二氨基 工具药 亚氨基 离体 羟基 休克 中风 肿瘤 疾病 开发 研究 | ||
1.一种抑制离体人胱硫醚-β-合成酶(hCBS)酶促反应的方法，其步骤如下：
步骤一、配制缓冲溶液：在酶促反应容器中配置Tris-HCl浓度为50mM，PLP浓度为100μM，hCBS-413浓度为50-500nM，L-Cys浓度为4mM，D,L-HCys浓度为4mM的去离子水溶液，pH为7.6-9.0；
步骤二、配制酶促反应混合液：将化合物7-氨基-2-羟基-5-亚氨基-6,7-二氢喹啉-8(5H)-酮分别加入到步骤一所配制的缓冲溶液中，配制成不同浓度的酶促反应混合液，形成酶促反应体系；
步骤三、配制H2S气体检测体系：
在H2S气体检测容器中，加入50μL的DTNB溶液，所述DTNB溶液为：DTNB浓度为300μM，Tris-HCl浓度为262mM，EDTA浓度为13mM，pH＝8.9的去离子水溶液，形成H2S气体检测体系，将气体检测容器置入酶促反应容器中，以使酶促反应产生的H2S气体能够扩散进入气体检测体系；
步骤四、孵育过程：
用封板膜密封酶促反应容器，在37℃下孵育60分钟；
步骤五、化合物7-氨基-2-羟基-5-亚氨基-6,7-二氢喹啉-8(5H)-酮作为hCBS抑制剂应用效果的检测：
在酶标仪上测定H2S气体检测体系在413nm下的光吸收。
2.如权利要求1所述的方法，其中，步骤一中所述pH＝8.6。
3.如权利要求1所述的方法，其中，步骤一中所述hCBS-413浓度为100nM。
4.如权利要求1所述的方法，其中，步骤二中所述化合物7-氨基-2-羟基-5-亚氨基-6,7-二氢喹啉-8(5H)-酮的浓度为4-400μM。
5.如权利要求1所述的方法，其中，步骤二中所述化合物7-氨基-2-羟基-5-亚氨基-6,7-二氢喹啉-8(5H)-酮的浓度为4μM。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海交通大学，未经上海交通大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310467300.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
