[发明专利]毛发中阿片类物质的提取和检测方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药检测技术领域，特别是涉及毛发中阿片类物质的提取方法和检测方法。 

背景技术

毒品和滥用成瘾性药物危害人体健康和社会安全，一直是国家依法严厉打击的对象，人体毒品残留的检测手段，对执法的辅助作用至关重要。毛发分析具有易取材、易保存、检出时限长，反映药物滥用史信息全面，易重复取样等独特优势，已广泛用于法医毒物学、临床毒物学、职业医学及兴奋剂控制等领域。毛发中常见滥用药物分析的证据性质已得到大部分国家的法庭认可。 

毛发中成分复杂，存在大量干扰物质，为检测毛发中的阿片类毒品，必须建立有效的前处理方法分离提取目标物。毛发中毒品检测通常先用酸水解、碱水解、酶水解或甲醇等方法进行提取，再进行液液萃取或固相萃取达到净化的目的。酸水解法条件较为温和，释放效率较高，但该方法依然存在酸水解时间太长，不满足时效性需求的缺点，如《生物检材中吗啡类生物碱的LC-MS/MS分析》中头发采用0.1mol/L HCl溶液45℃水浴浸泡过夜（Journal of Forensic Medicine,February2006,Vol.22,No.1）。碱水解药物释放完全，但条件激烈；酶水解适用范围广，释放效率高，但价格昂贵。 

目前，亟需一种对毛发中的阿片类物质（包括吗啡、单乙酰吗啡、可待因、度冷丁等）进行高效分离提取的方法，以及进行高灵敏度和高特异性检测的方法。 

发明内容

本发明的目的之一是提供一种毛发中阿片类物质的提取方法，该方法非常 温和，同时又能够有效富集得到阿片类物质。 

实现上述目的的技术方案如下。 

一种毛发中的阿片类物质的提取方法，包括以下步骤： 

（1）清洗毛发，以液氮研磨，得到毛发粉末； 

（2）加入复合毛发处理液并进行超声处理，离心得到预处理上清液；所述复合毛发处理液是0.02-0.5mol/L的磷酸盐缓冲溶液，含0.5%-10%的牛血清蛋白、0.1%-5%的吐温20，且pH值2.0-5.0； 

（3）固相萃取柱经平衡后，注入所述毛发预处理上清液，依次用水、0.05-0.5mol/L醋酸溶液、甲醇和乙酸乙酯洗涤杂质；用体积比为90:10-98:2的乙酸乙酯：氨水混合溶液洗脱阿片类物质，得到固相萃取洗脱液。 

优选地，所述复合毛发处理液是0.025-0.3mol/L的磷酸盐缓冲溶液，含0.5%-5%的牛血清蛋白、0.1%-3%的吐温20，且pH值2.0-4.0。 

优选地，步骤（2）所述的超声处理为37-85℃下进行1.0-6小时。 

优选地，步骤（2）所述的超声处理为65-85℃下进行1.0-3.0小时。 

优选地，步骤（3）固相萃取柱依次经甲醇和磷酸盐缓冲液进行平衡。 

在其中一个实施例中，该方法还包括有衍生步骤：将固相萃取洗脱液吹干后，用体积比为1:4-4:1的乙酸乙酯：N，O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺混合溶液（BSTFA）进行衍生，得到衍生产物。 

优选地，所述衍生步骤的条件为：65-85℃，反应15-50分钟。 

本发明的另一目的在于，还提供一种对毛发中的阿片类物质的检测方法，该检测方法灵敏度高，特异性好。 

实现上述目的的技术方案如下： 

一种对毛发中的阿片类物质的检测方法，包括以下步骤： 

（1）根据上述提取方法得到所述固相萃取洗脱液或衍生产物； 

（2）采用气相色谱质谱联用仪（GC/MS-SIM）或液相色谱质谱联用仪（LC/MS/MS）对所述固相萃取洗脱液或衍生产物进行检测。 

在其中一个实施例中，所述气相色谱质谱联用仪检测方法的操作条件如下： 

色谱柱CD-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)色谱柱； 

进样口温度为180-280℃； 

采用程序升温模式，柱温：

在其中一个实施例中，所述液相色谱质谱联用仪检测方法的操作条件如下： 

色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18 2.1×150mm,3.5μm(安捷伦公司)，接ZORBAX Eclipse XDB-C18（2.1×12.5mm）保护柱； 

柱温：室温； 

流动相:乙腈-缓冲液（70：30），缓冲液为20mmol/L乙酸铵和0.2%甲酸的溶液； 

流速：300μL/min；