[发明专利]一种从鲜荷叶中同步分离荷叶黄酮和叶绿素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种荷叶提取物的提取方法，特别是涉及一种从荷叶中同步分离荷叶黄酮和叶绿素的方法。

背景技术

荷叶为睡莲科植物莲的叶子，为药食两用植物叶。荷叶中含有黄酮、生物碱等活性物质。现代医学研究表明，荷叶黄酮具有抗氧化、抗衰老、清热、降血脂、降胆固醇以及治疗心脑血管疾病等功能。荷叶生物碱具有降脂减肥、抑菌、抗病毒的作用。荷叶中还含有多糖，多糖具有特殊的生物活性，是一种免疫调节剂，并且没有毒副作用，可以作为临床用药或疫苗。荷叶中的叶绿素作为一种天然色素可以广泛的应用于医药、食品、化妆品等行业。

现有技术中对荷叶中荷叶黄酮的提取大多采用干荷叶，需要对鲜荷叶进行干燥粉碎，不仅增加了提取过程的操作步骤，而且浪费了荷叶中富含的叶绿素。另外，现有的荷叶黄酮的提取方法中，主要采用水提法或有机溶剂浸提法从荷叶中提取荷叶黄酮后，辅助其他方法进行提纯分离，如柱层析法、薄层层析法、铅盐沉淀法等，但均存在不同的缺点而限制了工业化应用。目前的提取技术所得到的荷叶黄酮杂质含量高，导致荷叶黄酮含量较低，限制了荷叶黄酮的应用。

因此，急需开发一种荷叶的提取方法，能够对鲜荷叶进行深度综合利用，从鲜荷叶中同时分离出荷叶黄酮和叶绿素，提高荷叶黄酮的纯度，并且能够进一步从荷叶中分离得到荷叶生物碱和多糖。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从鲜荷叶中同步分离荷叶黄酮和叶绿素的方法，该方法简单易行，生产成本低，适于工业化应用，并且该方法能够获得高纯度的荷叶黄酮，而且能够进一步提取荷叶生物碱和多糖，实现对荷叶的深度综合利用。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种从鲜荷叶中同步分离荷叶黄酮和叶绿素的方法，包括如下步骤：

a、将重量比为1:8-25的鲜荷叶和质量浓度为90-95%的乙醇加入提取罐中，于30-80℃提取2-4次，每次提取1-2小时，合并提取液，鲜荷叶是指含水量大于70%（质量）的新鲜荷叶；

b、向步骤a得到的提取液中加入石油醚，提取液与石油醚的体积比为2-3:1，搅拌，静置，得到含有石油醚和叶绿素的萃取液层以及含有乙醇、荷叶黄酮、荷叶生物碱和多糖的萃余液层；

c、将所述步骤b得到的含有石油醚和叶绿素的萃取液在真空度不小于700mmHg下进行减压浓缩，得到绿色油状液体，真空度=大气压强-绝对压强，也即真空表的表压；

d、将步骤b得到的萃余液通过超滤膜超滤，除去杂质和蛋白质等大分子物质，得到通过超滤膜的浓缩液，超滤膜优选截留分子量为10000的超滤膜；

e、将步骤d得到的浓缩液加入纯净水稀释，优选，纯净水与浓缩液的质量比为90-100:1，将稀释后的溶液过大孔吸附树脂柱，荷叶黄酮被吸附在大孔吸附树脂上，经洗脱、浓缩干燥得到荷叶黄酮。大孔吸附树脂采用能够吸附荷叶黄酮的树脂即可，如AB-8、D101、D201等已知能吸附荷叶黄酮的树脂。发明人在研究过程中发现大孔吸附树脂XDA-6对荷叶黄酮具有优异的选择吸附性能，采用XDA-6大孔吸附树脂可以使分离得到的荷叶黄酮纯度达到98%以上，XDA-6可以通过市场购买获得，生产厂商如扬州制药厂、西安蓝晓科技有限公司等，XDA-6树脂的比表面积为600m2/g，平均孔径为（音译为“埃”，10的负10次方米，纳米的十分之一），偶极矩0.4，平均粒径500μm，均一系数（D90/D40）1.6。

上述从鲜荷叶中同步分离荷叶黄酮和叶绿素的方法，其中，所述步骤c中，将减压浓缩得到的绿色油状液体进行微波真空干燥，真空度不小于740mmHg，温度不高于60℃，干燥后得到叶绿素粉末，叶绿素的色价可以达到200以上，可以直接应用于食品、化妆品、医药等领域。

上述从鲜荷叶中同步分离荷叶黄酮和叶绿素的方法，其中，所述步骤e中，用质量浓度为70%的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱上吸附的荷叶黄酮，将洗脱液通过100分子量的膜浓缩，得到被100分子量膜截留的浓缩液，浓缩液经喷雾干燥得到荷叶黄酮。采用100分子量膜对洗脱液进行浓缩，避免了加热浓缩方法中高温对荷叶黄酮活性的破坏，有效的保持了荷叶黄酮的活性。