[发明专利]表皮生长因子受体模拟表位肽及其应用

说明书

本发明是申请号为201010023003.9的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于生物技术领域；更具体地，本发明涉及表皮生长因子受体模拟表位肽及其应用。

背景技术

表皮生长因子受体(EGFR)是一个分子量为170KD的酪氨酸激酶受体，它对于不同细胞的增殖和分化起着相当重要的作用。细胞的恶性转化和EGFR的信号通路的增强有着密切的联系。EGFR的信号通路的激活会促进细胞的增殖、肿瘤的侵袭、肿瘤内部的血管新生和肿瘤的转移。EGFR在许多上皮源性肿瘤中过表达，而且过表达的水平与患者的预后有着密切的联系。EGFR的过表达通常是由基因的扩增，亦或者是由于表皮生长因子突变引起的。最常见的EGFR的突变体是表皮生长因子受体III型变异体(EGFRvIII)，它主要缺失了编码序列第2外显子到第7外显子的801碱基，这直接导致了EGFR胞外区267个氨基酸的缺失，并在外显子连接处形成了一个新的甘氨酸。EGFRvIII在脑胶质瘤，乳腺癌，非小细胞肺癌和前列腺癌中可被检测到，在正常组织中不表达。

由于EGFR在癌症的发生发展过程有着重要的影响，因此针对EGFR的治疗方法也在不断的发展。mAb806单克隆抗体(Luwor RB等，Monoclonal antibody806inhibits the growth of tumor xenografts expressing either the de2-7or amplified epidermal growth factor receptor(EGFR)but not wild-type EGFR.Cancer Res.2001;61(14):5355-61.)能够较特异地识别过表达的EGFR和EGFRvIII，研究表明mAb806能够抑制过表达EGFR或表达EGFRvIII的细胞生长。临床I期研究表明，mAb806单抗的人鼠嵌合体CH806能够特异地靶向肿瘤组织(Scott AM等，A phase I clinical trial with monoclonal antibody ch806targeting transitional state and mutant epidermal growth factor receptors.Proc Natl Acad Sci U S A.2007;104(10):4071-6.)。mAb806单抗识别EGFR上的多肽序列为²⁸⁷CGADSYEMEEDGVRKC³⁰²(Johns TG等，Identification of the epitope for the epidermal growth factor receptor-specific monoclonal antibody806reveals that it preferentially recognizes an untethered form of the receptor.J Biol Chem.2004Jul16;279(29):30375-84.)。所以这段多肽序列有望作为疫苗。但是因为这段多肽在正常组织中就存在，如果直接用于人体，可能会因为免疫耐受难以产生相应的单抗，因此需要找到这段多肽的模拟表位肽(mimotope)，用于抗肿瘤疫苗的研制。本发明人在前期研究中筛选到了一个单克隆抗体12H23(国际专利申请号：PCT/CN2009/074090)，它能够识别EGFRvIII和过表达的EGFR，并且在体内体外实验中能够有效的抑制HuH7-EGFRvIII人肝癌细胞及SMMC-7721细胞的生长。研究发现该抗体的表位多肽序列也是²⁸⁷CGADSYEMEEDGVRKC³⁰²。

单克隆抗体应用于临床仍旧存在着一些限制，比如高昂的治疗费用，仍不够理想的疗效，来自鼠抗或嵌合抗体的副作用以及需要多次免疫才能产生足够的效价。如果用抗体结合位点的结构模拟多肽来免疫人体，使人体自身产生主动免疫，并能够持续产生抗体，就有可能解决单克隆抗体所不能解决的问题。模拟表位肽，在结构上同抗体结合表位类似，但氨基酸序列有可能是不同的，这样有利于在人体内大量产生针对该表位的抗体。因此，本领域迫切需要找到所述表位多肽的模拟表位肽，使其能够诱导产生主动免疫的疫苗。

发明内容

本发明的目的在于提供表皮生长因子受体模拟表位肽及其应用。

本发明的目的还在于提供一种具有免疫原性的物质及其应用。