[发明专利]一种促性腺激素释放激素类似物的组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种促性腺激素释放激素类似物的组合物，其采用液相色谱与质谱联用技术测定，同时测定睾酮和促性腺激素释放激素类似物。

背景技术

促性腺激素释放激素(LHRH)，是丘脑下部弓状核合成的10肽，结构为Pyro-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂，下丘脑脉冲释放LHRH，可以刺激垂体释放促性腺激素释放激素，1971年Schall从50万头猪、羊下丘脑分离出几毫克的LHRH，并人工合成确证了LHRH的结构，因此获得诺贝尔医学与生理学奖。哺乳动物的LHRH具有相同的结构，LHRH的第5～6、6～7、9～10位氨基酸链稳定性差，极易受肽链内切酶作用而裂解，因而LHRH在体内半衰期仅有2～4min，如果将其6位和10位氨基酸进行置换或去除，可得到9肽LHRH激动剂(agonists)，其化学结构与LHRH极为相似，但稳定性大大提高，半衰期可达5h以上。LHRH激动剂和LHRH拮抗剂(antagonist)，统称LHRH类似物（LHRHa），它们都是通过与内源性LHRH竞争受体而发挥作用。

促性腺激素释放激素类似物可因给药方式和用药剂量的不同而引起性腺轴的正反双向反应。生理脉冲式注射LHRH对垂体-性腺轴起兴奋与刺激作用，表现为升调节，促进青春期发育，对维持生殖系统的功能具有重要作用。但大量的动物实验及临床观察发现，当给予外源性大剂量的LHRH或其类似物时，对生殖系统有抑制作用。促性腺激素释放激素类似物最初会刺激垂体分泌促性腺激素(Gn),即黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)。当垂体经过长期的刺激后会进入不应期,促性腺激素的释放会减少,因而使性类固醇(睾酮)降低至去势水平。上述作用是可逆转的。临床上被用于治疗各种激素依赖性疾病如前列腺癌、子宫内膜异位、子宫肌瘤和性早熟等。

目前促性腺激素释放激素类似物组合物在临床上主要被用作治疗激素依赖性肿瘤如前列腺癌、乳腺癌等。市场上常用的有：①戈舍瑞林(Goserelin)，商品名诺雷德(Zoladex);②亮丙瑞林,商品名抑那通(Leuprorelin);③曲普瑞林(Triptorelin)，商品名达菲林(Diphereline);④布舍瑞林(Buserelin);⑤那法瑞林(Nafarelin)。

促性腺激素释放激素类似物组合物已上市的产品主要有注射剂和长效缓释制剂，其临床常用剂量非常低，临床应用的不良反应是由于激素的产生被抑制而可能引起的药理副作用，临床极低的用量，就可能引起极强的临床不良反应，因此临床治疗时应密切监测性类固醇血浆水平。检测药物体内浓度与药效指标参数变化，可以优化给药方案,可更有效发挥药物作用,提高临床疗效,这些情况都迫切需要建立一种操作简单，特异性好及高灵敏的检测技术。

促性腺激素释放激素类似物（如曲普瑞林、戈舍瑞林）目前多采用放射免疫进行定量，免疫法由于存在交叉反应，影响低浓度定量结果的准确性，并且其具有放射性，对检测人员有潜在的伤害可能；且其试剂盒非常昂贵，不适合临床及科研使用；睾酮的定量过程有液质联用分析和酶联免疫法。液质联用分析采用衍生化样品前处理，操作复杂，同时睾酮做为一种内源性化合物，从分析角度来说，使得分析更加复杂。如果需要同时获得睾酮和促性腺激素释放激素类似物的数据，目前采用的是同一时间段采集二个血浆样品，分别处理，分别测定（Pharmacokinetic/pharmacodynamic model of the testosterone effects of triptorelin administered in sustained release formulations in patients with prostate cancer—Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics(2012),342(3),788-798），此种处理使得样品前期处理的工作量大，批次之间可能会造成差异，采用不同检测数据之间统计分析也会有较大误差。

为了克服这些缺点，我们将睾酮和促性腺激素释放激素类似物同时提取出来，进一步采用液质联用来同时进行睾酮和促性腺激素释放激素类似物的定量分析。采用此分析过程能降低成本，减少工作量，操作简单、结果准确、特异性好、灵敏度高，极大的提高分析速度，减少结果偏差；给临床用药如给药间隔、剂量调整等提供准确指导，同时对促性腺激素释放激素类似物组合物设计提供更好的支持。

发明内容