[发明专利]通过使用单链多肽融合蛋白进行疼痛的治疗

权利要求书

1.单链的多肽融合蛋白，其从N-末端至C-末端包含：

a).非细胞毒性蛋白酶，所述蛋白酶能够剪切疼痛感应传入器的胞吐融合器的蛋白；其中所述非细胞毒性蛋白酶是梭菌神经毒素L-链蛋白酶或IgA蛋白酶；

b).蛋白酶剪切位点，在该位点所述融合蛋白可被蛋白酶剪切；

c).能够结合所述疼痛感应传入器上之结合位点的阿片样物质靶向部分，所述结合位点能够进行细胞内吞作用，以被并入疼痛感应传入器中的内涵体内；其中所述靶向部分选自：伤害感受肽、β-内啡肽、内啡素-1、内啡素-2、强啡肽、met-脑啡肽、leu-脑啡肽、甘丙肽、和PAR-2肽；和

d).转运区域，其能够将所述蛋白酶从内涵体中跨内涵体膜转运，并进入所述疼痛感应传入器的细胞溶胶中；其中所述转运区域是梭菌神经毒素的HN区域、或选自如下的转运区域：白喉毒素、假单胞菌外毒素A的结构域II、炭疽病毒素、源自流感病毒血凝素的融合和/或两亲肽、塞姆利基森林病毒融合蛋白、水泡性口炎病毒糖蛋白G、SER病毒F蛋白、泡沫病毒包膜糖蛋白；

其中所述靶向部分和所述蛋白酶剪切位点由最多10个氨基酸残基分隔，

并且其中所述靶向部分和所述蛋白酶剪切位点不由0个氨基酸残基分隔。

2.单链的多肽融合蛋白，其从N-末端至C-末端包含：

a).非细胞毒性蛋白酶，所述蛋白酶能够剪切疼痛感应传入器的胞吐融合器的蛋白；其中所述非细胞毒性蛋白酶是梭菌神经毒素L-链蛋白酶或IgA蛋白酶；

b).蛋白酶剪切位点，在该位点所述融合蛋白可被蛋白酶剪切；

c).能够结合所述疼痛感应传入器上之结合位点的阿片样物质靶向部分，所述结合位点能够进行细胞内吞作用，以被并入所述疼痛感应传入器中的内涵体内；其中所述靶向部分选自：伤害感受肽、β-内啡肽、内啡素-1、内啡素-2、强啡肽、met-脑啡肽、leu-脑啡肽、甘丙肽、和PAR-2肽；和

d).转运区域，其能够将所述蛋白酶从内涵体中跨内涵体膜转运，并进入所述疼痛感应传入器的细胞溶胶中；其中所述转运区域是梭菌神经毒素的HN区域、或选自如下的转运区域：白喉毒素、假单胞菌外毒素A的结构域II、炭疽病毒素、源自流感病毒血凝素的融合和/或两亲肽、塞姆利基森林病毒融合蛋白、水泡性口炎病毒糖蛋白G、SER病毒F蛋白、泡沫病毒包膜糖蛋白；

其中所述蛋白酶和所述靶向部分彼此由最多100个氨基酸残基隔开，

其中所述蛋白酶和所述靶向部分不由0个氨基酸残基分隔。

3.单链的多肽融合蛋白，其从N-末端至C-末端包含：

a).非细胞毒性蛋白酶，所述蛋白酶能够剪切疼痛感应传入器的胞吐融合器的蛋白；其中所述非细胞毒性蛋白酶是梭菌神经毒素L-链蛋白酶或IgA蛋白酶；

b).蛋白酶剪切位点，在该位点所述融合蛋白可被蛋白酶剪切，

c).能够结合所述疼痛感应传入器上之结合位点的阿片样物质靶向部分，所述结合位点能够进行细胞内吞作用，以被并入所述疼痛感应传入器中的内涵体内；其中所述靶向部分选自：伤害感受肽、β-内啡肽、内啡素-1、内啡素-2、强啡肽、met-脑啡肽、leu-脑啡肽、甘丙肽、和PAR-2肽；和

d).转运区域，其能够将所述蛋白酶从内涵体中跨内涵体膜转运，并进入所述疼痛感应传入器的细胞溶胶中；其中所述转运区域是梭菌神经毒素的HN区域、或选自如下的转运区域：白喉毒素、假单胞菌外毒素A的结构域II、炭疽病毒素、源自流感病毒血凝素的融合和/或两亲肽、塞姆利基森林病毒融合蛋白、水泡性口炎病毒糖蛋白G、SER病毒F蛋白、泡沫病毒包膜糖蛋白；

并且其中

(i)所述非细胞毒性蛋白酶组分与所述融合蛋白的转运组分形成二硫键，其中形成二硫键的所述蛋白酶组分的氨基酸残基位于所述蛋白酶组分的最后20个C-末端氨基酸残基之内，并且形成二硫键的所述转运组分内的氨基酸残基位于所述转运组分的前20个N-末端氨基酸残基之内；或

(ii)所述非细胞毒性蛋白酶组分与所述融合蛋白的靶向部分组分形成二硫键，其中形成二硫键的所述蛋白酶组分的氨基酸残基位于所述蛋白酶组分的最后20个C-末端氨基酸残基之内，并且形成二硫键的在所述靶向部分组分中的氨基酸残基位于所述靶向部分组分的最后20个C-末端氨基酸残基之内。

4.根据权利要求1的融合蛋白，其中所述阿片样物质靶向部分和所述蛋白酶剪切位点由最多5个氨基酸残基分隔。