[发明专利]芹菜成分的环介导等温扩增引物、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种检测芹菜成分的环介导等温扩增引物，其特征在于，碱基序列为SEQ ID NO.1～4。

2.一种检测芹菜成分的环介导等温扩增法检测试剂盒，其特征在于，包括检测引物：SEQ ID NO.1～4。

3.根据权利要求2所述的检测芹菜成分的环介导等温扩增法检测试剂盒，其特征在于，在检测试剂盒中：

每25μL的LAMP反应体系包括：SEQ ID NO：3～4各1.6μM，SEQ ID NO：1～2各0.2μM，20mM pH8.8的Tris-HCl，10mM KCl，6mM MgSO₄，10mM(NH₄)₂SO₄，0.1%Tween20，1M甜菜碱，1.6mM dNTP，8U Bst大片断DNA聚合酶，0.5μl SYTO-9，2μl DNA模板。

4.利用权利要求2所述试剂盒检测芹菜成分的方法，其特征在于，检测步骤包括：

①提取待测样品的基因组DNA；

②以步骤①提取的DNA作为模板，利用环介导等温扩增法检测：

每25μL的LAMP反应体系包括：SEQ ID NO：3～4各1.6μM，SEQ ID NO：1～2各0.2μM，20mM pH8.8的Tris-HCl，10mM KCl，6mM MgSO4，10mM(NH₄)₂SO₄，0.1%Tween20，1M甜菜碱，1.6mM dNTP，8U Bst大片断DNA聚合酶，0.5μl SYTO-9，2μl DNA模板、蒸馏水：余量；

反应条件为：保温阶段为63℃ 30s，1个循环；循环阶段为63℃ 15s，63℃ 45s，45个循环。

5.如权利要求1所述的环介导等温扩增引物在检测芹菜成分方面的应用。