[发明专利]一种用于生产罗米地辛的方法及发酵培养基

说明书

本发明公开了一种用于生产罗米地辛的方法及发酵培养基。本发明公开了一种用于生产罗米地辛的发酵培养基，其包含碳源、有机氮源和无机磷酸盐；所述的碳源包括葡萄糖和甘露醇，所述的有机氮源包括玉米浆、干酪素和黄豆粉；所述的碳源占所述发酵培养基的含量为4%～10%；所述的有机氮源占所述发酵培养基的含量为2%～5%；所述的无机磷酸盐占所述发酵培养基的含量为0.1%～2.1%，以上含量均为重量含量。本发明还公开了一种用于生产罗米地辛的方法。本发明的发酵培养基用于生产罗米地辛时，产量提高到500～600mg/L，较现有技术中的发酵培养基提高了150%～200%以上。

技术领域

本发明涉及一种用于生产罗米地辛的方法及发酵培养基。

背景技术

罗米地辛（Romidepsin）是从紫色色杆菌（Chromobacterium violaceum）的发酵培养液中分离得到的一种天然多聚肽，其分子式为C₂₄H₃₆N₄O₆S₂，分子量为540。

罗米地辛是一种新型的组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂，HDAC是一类锌离子酰胺酶，在催化组蛋白脱乙酰基时，锌离子跟乙酰基上氧的水合物螯合形成过渡态，HDAC的过度或异常调控使组蛋白过度去乙酰化，染色体凝聚使转录受到抑制，引起相应基因表达下降，导致肿瘤病症发生。罗米地辛抗肿瘤机理为罗米地辛进入细胞后，由还原性谷胱甘肽（GSH）将其二硫键还原为巯基，巯基可竞争性结合HDAC上的Zn²⁺，使HDAC失效，从而达到抗肿瘤的目的。

专利US7396665B2中公开一种使用紫色色杆菌（Chromobacterium violaceum）WB968生产罗米地辛的方法，具体如下将一环罗米地辛的生产菌紫色色杆菌（Chromobacterium violaceum）WB968接入种子液（2%肉汤、1%葡萄糖），30℃摇床培养24h后接入发酵培养基（1%葡萄糖、2%肉汤培养基、KH₂PO₄1.1%、Na₂HPO₄·2H₂O0.72%、MgSO₄7H₂O0.006%、(NH₄)₂SO₄0.1%），于26.5℃下培养48h，如果在培养基中补充200mmol/L的L-半胱氨酸，产量最大达到224mg/L。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于克服了现有的用于生产罗米地辛的发酵培养基生产罗米地辛时产量低的缺陷而提供了一种用于生产罗米地辛的方法及发酵培养基。本发明的发酵培养基能够使罗米地辛的产量提高到500～600mg/L，较现有技术中的发酵培养基提高了150%～200%以上。

本发明提供了一种用于生产罗米地辛的发酵培养基，其包含碳源、有机氮源和无机磷酸盐；所述的碳源包括葡萄糖和甘露醇；所述的有机氮源包括玉米浆、干酪素和黄豆粉；所述的碳源占所述发酵培养基的含量为4%～10%；所述的有机氮源的含量为2%～5%；所述的无机磷酸盐的含量为0.1%～2.1%，以上含量均为重量含量。

其中，所述的碳源占所述发酵培养基的含量较佳地为4%～8%；所述的有机氮源占所述发酵培养基的含量较佳地为2%～4%；所述的无机磷酸盐占所述发酵培养基的含量较佳地为0.4%～1.2%，以上含量均为重量含量。

其中，所述的葡萄糖占所述发酵培养基的含量较佳地为1%～2.5%，更佳地为1.5%～2%。所述的甘露醇占所述发酵培养基的含量较佳地为2%～8%，更佳地为2%～6%，更佳地为4～6%，以上含量均为重量含量。