[发明专利]Sarcaboside A在治疗黄热病毒感染药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，更具体涉及一种Sarcaboside A在制备治疗或预防黄热病毒感染药物中的应用。

背景技术

黄热病毒（yellow fever virus，YFV）属于黄热毒科黄病毒属的成员。黄热病毒能够引起黄热病，该病为急性传染病。国际上已将黄热病定为检疫传染病，中国也将其定为甲类传染病。1648年，美洲的YUCATAN半岛首次证实黄热病的流行。17～19世纪，此病通过交通运输被带到欧洲及北美，在差不多两个世纪内，黄热病成为美、非、欧三大洲一些地方最严重的瘟疫之一，造成大量人群死亡。20世纪以来，本病在北美及欧洲未再发生，但在中、南美、非洲的一些国家和地区仍不时流行。据WHO（1983）报告，1979～1982年期间，黄热病在非洲发生50例，南美洲发生695例，估计实际病例数为上述报告数的35～480倍。埃及伊蚊是主要传播媒介。迄今为止，中国尚无病例的报道，但是这并不能使我们放松对该病毒的警惕，因为中国的气候、地理环境复杂，蚊虫种类繁多，具备传播条件，同时随着国际交流的日益频繁，YFV传入中国境内的可能性非常大。

因此，我们应该高度重视对黄热病毒的研究，加强对其的科研力度，做好相关知识和药物的储备。

本发明涉及的化合物Sarcaboside A是一个2012年发表（Li,X.et al.，2012.Two New-Skeleton Compounds from Sarcandra glabra.Helvetica Chimica Acta95(6)，998-1002.）的新骨架化合物，该化合物拥有全新的骨架类型，目前没有关于活性的报道，对于本发明涉及的Sarcaboside A在制备治疗黄热病毒感染药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于黄热病毒抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于黄热病毒感染的防治显然具有显著的进步。

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种Sarcaboside A在制备治疗或预防黄热病毒感染药物中的应用，Sarcaboside A在10.0uM浓度下对YFV的抑郁率为96.59%。而Sarcaboside A在浓度为100uM条件下，Vero细胞的存活率为91.1%。Sarcaboside A能够有效地抑制黄热病毒的增殖，但是对细胞毒性很小，可进一步开发为治疗这些病毒感染引起的疾病的药物，具有广泛的应用前景。

所述化合物Sarcaboside A结构如式（Ⅰ）所示：

本发明涉及的Sarcaboside A在制备治疗黄热病毒感染药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于黄热病毒抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于黄热病毒感染的防治显然具有显著的进步。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

A.Sarcaboside A对Vero细胞的毒性实验：

Vero细胞是YFV的易感细胞。因此，本实验首先检测Sarcaboside A对Vero细胞的细胞毒性，以不同浓度的Sarcaboside A作用于Vero细胞，来了解在细胞存活率为90%以上的Sarcaboside A的最大使用浓度，为后续的Sarcaboside A对YFV的抑制作用实验提供参考数据。

B.Sarcaboside A对YFV的抑制实验：

以不同浓度的Sarcaboside A作用于已经感染了YFV的Vero细胞，来获得Sarcaboside A对病毒的抑制效率。本实验中的Sarcaboside A的使用浓度均在使Vero细胞在90%以上存活率的浓度的范围内，因此，可以排除Sarcaboside A的浓度过高而对实验数据的分析产生影响。

一种Sarcaboside A在制备治疗或预防黄热病毒感染药物中的应用，其步骤是：

A.Sarcaboside A对Vero细胞的毒性实验：

Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）是YFV的易感细胞。实验中的Vero细胞购买于中国科学院上海生科院细胞资料中心；MTT试剂盒购于碧云天生物技术研究所；胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）购买于美国GIBCO公司；细胞培养板购买于德国Greiner bioone公司；DMEM培养基和MEM培养基购买于美国GIBCO公司。

实验步骤如下：