[发明专利]一种提取美登福隆A的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学技术领域，涉及一种一种提取美登福隆A的方法。

背景技术

美登福隆A（Maytenfolone A），mp.166-168℃，分子式为C₃₀H₄₆O₄，分子量为470.69，结构式为：

美登福隆A是从卫予科(celastraceae) 青江藤 Celastrus hindsii Benth.茎中分离得到一种三萜类化合物。药理研究表明，美登福隆A具有细胞毒活性，对肝癌HEPA-2B和鼻咽癌KB细胞的ED50分别为2.3μg/mL和3.8μg/mL。

现有技术中，尚未见工业化制备美登福隆A的生产工艺报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取美登福隆A的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种提取美登福隆A的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）以青江藤的茎为原料，切成段状，放入高速组织捣碎机，在转速为18000rpm条件下保持3-5min后，过40目筛备用；

（2）原料按照料液比1:4-6（g/ml）的比例加入乙醇水溶液后，再加入0.3-0.5%的纤维素酶，在超声功率500-700W、45-60℃条件下酶解60-90min，得到酶解原料；

（3）将酶解原料投入加入闪式提取器中，加入提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液，浓缩干燥得到粗提物；

（4）将所得粗提物用甲醇溶解，干法上样至高压硅胶柱层析纯化，氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗脱，收集美登福隆A流分，减压浓缩，冷却析晶，得粗晶；

（5）将粗晶用乙酸乙酯重结晶得到美登福隆A白色结晶。

所述步骤（2）中乙醇水溶液体积百分比为70-80%。

所述步骤（2）中提取溶剂为70-85%的乙醇溶液。

所述步骤（3）中闪式提取电压为150V，提取时间为3-5min。

所述步骤（4）中所述高压硅胶柱层析，硅胶目数为200目，耐压35MPa，柱内径为250mm，层析柱径高比为1：10。

所述步骤（4）中所述氯仿-甲醇的体积比为1:1-1:13。

本发明的有益效果是：本发明操作简单，耗时短，得率高，易规模化生产；采用高压层析柱，上样量大，生产周期短，分离度好，产品纯度高。

 

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

以青江藤的茎为原料，切成1cm左右段状，放入高速组织捣碎机，在转速为18000rpm条件下保持5min后，过40目筛备用，称取1kg，按照料液比1:4（g/ml）的比例加入80%乙醇水溶液后，再加入0.5%的纤维素酶，在超声功率700W、50℃条件下酶解70min，得到酶解原料，加入闪式提取器中，加入6L80%的乙醇溶液作为提取溶剂，提取电压为150V，提取时间为3min，进行闪式提取2次，过滤得到提取液，提取液浓缩干燥后得到粗提物，用甲醇溶解，干法上样至高压硅胶（硅胶目数为200目）柱层析纯化，耐压35MPa，柱内径为250mm，层析柱径高比为1：10，氯仿-甲醇按体积比为1:1、1:6、1:13梯度洗脱，收集美登福隆A流分，减压浓缩，冷却析晶，得粗晶，粗晶用乙酸乙酯重结晶得到美登福隆A白色结晶，含量为95.8%。

 

实施例2：

以青江藤的茎为原料，切成1cm左右段状，放入高速组织捣碎机，在转速为18000rpm条件下保持3min后，过40目筛备用，称取1kg，按照料液比1:6（g/ml）的比例加入70%乙醇水溶液后，再加入0.4%的纤维素酶，在超声功率700W、45℃条件下酶解90min，得到酶解原料，加入闪式提取器中，加入4.5L75%的乙醇溶液作为提取溶剂，提取电压为150V，提取时间为5min，进行闪式提取2次，过滤得到提取液，提取液浓缩干燥后得到粗提物，用甲醇溶解，干法上样至高压硅胶（硅胶目数为200目）柱层析纯化，耐压35MPa，柱内径为250mm，层析柱径高比为1：10，氯仿-甲醇按体积比为1:1、1:7、1:13梯度洗脱，收集美登福隆A流分，减压浓缩，冷却析晶，得粗晶，粗晶用乙酸乙酯重结晶得到美登福隆A白色结晶，含量为94.4%。

 

实施例3：