[发明专利]一种牛磺酸的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及牛磺酸，尤其是涉及一种牛磺酸的检测方法。

背景技术

牛磺酸（Taurine，NH₂CH₂CH₂SO₃H）是一种含硫的非蛋白质结构的氨基酸，并且氨基在β位，与普通氨基酸的存在本质区别，具有很强的生物活性，被广泛应用于保健食品和医药领域。牛磺酸天然品除了存在牛胆汁中，还广泛分布于动物体的各组织、器官，特别是肌肉、神经组织、视网膜中含量较高，海生动物含量尤为丰富。牛磺酸主要以游离态存在于体液中、细胞内和组织间，是体内含量最多的游离氨基酸。而牛磺酸在海洋生物中含量较为丰富，且以游离形式存在，使天然提取法成为目前牛磺酸提取的发展新方向。但是传统的天然提取都是通过直接将水产原料软体部分打浆后实现的，使水产品无法得到综合利用。我国海洋资源丰富，章鱼就是其中一种应用甚广的水产品原料，然而在章鱼加工中其下脚料通常都被遗弃。在这些下脚料中，游离态天然牛磺酸的含量高达1.03%，在已有水产品中含量最高，原料来源广且安全，具有较好的发展前景。

目前牛磺酸的检测方法主要有：

1、高效液相色谱法：以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。此种方法检测牛磺酸前处理复杂，检测时间长，而且灵敏度低（鞠毅，夏桂荣，车燕妮等.高效液相色谱仪基本原理、应用及常见故障[J].医疗设备信息，2004，19(8):69-70）。

2、吸光光度法：是采用分光器获得纯度较高的单色光，基于物质对单色光的选择性吸收测定物质组分的分析方法。此种方法检测氨基酸时会有同吸收峰的物质所干扰，而无法得到正确的数据。

3、氨基酸分析法：是指用于测定蛋白质、肽及其他药物制剂的氨基酸组成或含量的方法。但是此种方法灵敏度（最低检测限）较低。

4、荧光分析法：是利用某些物质被紫外照射后发生的能反映出该物质特性的荧光，可以进行定性或定量分析的方法。此种方法仪器昂贵，成本较高。

5、离子色谱分析法：是利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法。近年来，离子色谱在氨基酸检测方面已日臻成熟，分析速度快，通常几分钟至十几分钟；检测灵敏度高，检测限可达10^-8～10^-12；选择性好，对于非离子性物质无保留；可以实现多离子同时分析；离子色谱柱的稳定性高，使用寿命长。

由于牛磺酸作为一种氨基酸，对人体有重要意义，被广泛应用于食品、医学及化妆品等领域。所以建立一个快速、高效、准确的牛天然磺酸定性定量检测方法具有重要的意义，以促进海洋低值产品中天然牛磺酸提取方法的研究。

发明内容

本发明的目的旨在提供一个快速、高效、准确，使牛磺酸的检测效率提高并可用于实验和生产的一种牛磺酸的检测方法。

本发明包括以下步骤：

1）专属性实验：确定牛磺酸在离子色谱中的出峰时间17.97min，空白供试液中的18种氨基酸无干扰，说明专属性良好；

2）绘制牛磺酸的标准曲线：确定牛磺酸在5～400μg/mL的范围内呈良好的线性关系；

3）精密度实验：确定仪器的准确性良好；

4）稳定性实验：48h内对样品进行检测RSD=1.14%，说明样品在48h内稳定性良好；

5）检测限与定量限测定：确定检测限在5μg/mL，定量限在10μg/mL；

6）加样回收率实验：由加样回收率实验确认仪器的回收效果良好。

本发明包括专属性试验、绘制牛磺酸的标准曲线、精密度实验、稳定性实验、检测限与定量限测定和加样回收率实验，通过对实际样品的检测，表明本发明的离子色谱法检测牛磺酸不仅无需对样品进行前处理，步骤简单，灵敏度高，牛磺酸出峰时间短，而且检测牛磺酸的最低限度高。

附图说明

图1牛磺酸对照品的离子色谱图。流动相：梯度(参见表1)，流速：0.24mL/min；柱温：30℃；检测方法：积分脉冲安培检测器。

图2牛磺酸空白试液和标准品供试液的离子色谱图。流动相：梯度(参见表1)，流速：0.24mL/min；柱温：30℃；检测方法：积分脉冲安培检测器。

图3离子色谱法检测牛磺酸的标准曲线。