[发明专利]一种毒品检测酶联免疫试剂盒及其检测方法

说明书

技术领域

本发明属于违禁品检测分析技术领域，具体涉及一种检测尿液、唾液、血液、毛发中毒品的酶联免疫试剂盒及其检测方法。

背景技术

在国际毒潮泛滥影响下，我国的毒品形势十分严峻，截止到2013年5月底的统计数字，中国当前吸毒群体222万人，此外还有不少隐性吸毒人员。因此，为了预防和惩治毒品违法犯罪行为，保护公民身心健康，维护社会秩序的工作，建立准确可靠、灵敏度高的毒品检测是十分必要的。

鸦片类毒品大都有致幻性和麻醉性，具有镇痛作用，主要包括鸦片、大麻、海洛因、吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因等。苯丙胺类毒品是指以苯丙胺为母体的一类人工合成的化合物。在我国管制的精神药品中，属于该类毒品的有苯丙胺、甲基苯丙胺(冰毒)、还有其苯环上的取代衍生物3，4-亚甲二氧基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺(摇头丸)等。K粉，医学上称氯胺酮，属于静脉全麻药品，具有一定的精神依赖性。K粉成瘾后，在毒品作用下，吸食者会疯狂摇头，很容易摇断颈椎；同时，疯狂的摇摆还会造成心力、呼吸衰竭。吸食过量或长期吸食，可以对心、肺、神经都造成致命损伤，对中枢神经的损伤比冰毒还厉害。据近年国家食品药品监督管理局发布的《药物滥用监测报告》显示，我国目前主要受到的是以吗啡、海洛因、杜冷丁等为主的传统毒品和以冰毒、摇头丸、K粉、咖啡因等为主的新型毒品的危害。

目前报道用于检测毒品的方法主要有气相色谱法(GC)、气相色谱-质谱联用法(GC／MS)、高效液相色谱(-HPLC)、高效液相色谱-质谱联用法(HPLC／MS)、毛细管电泳法(CE)以及免疫分析法(IA)等。色谱法是目前国际上普遍采用的检测方法，灵敏度高、准确性好，常作为药物残留检测的确认方法，但其对仪器和操作人员要求都较高，成本也比较高，一个样品检测要几百元，检测时间也很长，不利于在基层单位推广使用。免疫分析法是国际上通用的一种毒品筛选方法。目前常用的胶体金法受所用的生物制剂的影响，假阳性出现的概率很高，而且由于胶体金法灵敏度低，颜色判断有人为因素致使准确性差。

因此建立一种快速、灵敏、准确，并可以大批量应用于毒品检测的方法是具有非常重要的现实意义的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测尿液、唾液、血液、毛发中毒品的酶联免疫试剂盒，解决目前的检测毒品方法“快而不灵，灵而不快”的技术问题。

本发明的目的还在于提供一种应用上述试剂盒进行毒品检测的方法。

一种毒品检测酶联免疫试剂盒，包含以下物质：毒品标准品溶液，毒品特异性抗体；包被有毒品特异性抗体的酶标板；毒品抗原酶标记物；显色剂；浓缩洗涤液；终止液和样品稀释液。

所述毒品为吗啡，氯胺酮，大麻，海洛因，6-单乙酰吗啡，可待因或苯丙胺类化合物。

所述苯丙胺类化合物为苯丙胺，甲基苯丙胺，3，4-亚甲二氧基苯丙胺或3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺。

所述毒品特异性抗体为用毒品与载体蛋白通过碳化二亚胺法合成的偶联物，所述载体蛋白为鼠血清蛋白、牛血清蛋白、甲状腺蛋白、兔血清蛋白或血蓝蛋白。

所述毒品抗原酶标记物中的标记酶为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酯酶。

所述显色剂为邻苯二胺或四甲基联苯胺。

所述浓缩洗涤液为含有0.5％吐温-20，0.01mol／L的磷酸盐缓冲液；终止液为1-2mol／L的硫酸，盐酸或氢氧化钠缓冲液；样品稀释液为0.01mol／L的磷酸盐缓冲液。

采用上述试剂盒进行毒品检测的方法，按照如下步骤进行：

(1)样品前处理

当被检样品为尿液，唾液，血液时，直接进行检测；当被检样品为毛发时，先用甲醇溶液清洗，清洗晒干后用剪刀剪成1-10mm的片段，称取2-20mg的上述毛发片段，加入0.5-2ml甲醇溶液，70-75℃水浴两小时后静止冷却至室温，取上清液37℃氮吹干，残渣用100-200ul样品稀释液稀释，振荡器上振荡充分溶解，待检测；

(2)向包被有毒品特异性抗体的酶标板上，加入样品溶液或毒品标准品溶液以及毒品抗原酶标记物溶液室温孵育15-30分钟，待测样品中的毒品与酶标记的毒品竞争酶标板上的毒品抗体，洗板3次，通过洗涤除去未结合的酶标记物，加显色剂室温孵育5-15分钟，显色后用终止液终止，酶标仪测定样品的吸光度值；

(3)步骤(2)获得的吸光度值与样品中毒品的量呈负关系，与标准曲线比较即可得出样品中毒品的浓度。