[发明专利]一种提取纯化可食当归素Ⅴ的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物领域，具体而言，本发明涉及一种提取纯化可食当归素Ⅴ的方法。

背景技术

可食当归素Ⅴ（Edulisin Ⅴ），CAS号158446-39-0， mp.113.5-115.0℃，分子式C₂₄H₂₈O₇，分子量428.48，结构式为：

可食当归素Ⅴ来源于伞形科(Umbelliferae) 可食当归 Angelica edulis Miyabe的果实。研究表明，可食当归素Ⅴ具有抗肿瘤促进作用。抑制TPA诱导的32Pi掺入HeLa细胞磷脂中。在50μg/mL时，抑制率100%；10μg/mL时，抑制率83.9%。

经文献检索，尚无适用于高纯度可食当归素Ⅴ的易于工业化提取纯化方法的相关专利报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种适用于规模化生产、产品纯度高的提取纯化可食当归素Ⅴ的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种提取纯化可食当归素Ⅴ的方法，其特征在于按如下工艺步骤进行：

（1）以可食当归果实为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取可食当归果实中的油脂类物质；

（2）残渣加8-10倍（V/W）75-90%乙醇溶液进行超声循环提取2-3次，每次1-2h，合并提取液；

（3）提取液浓缩后上D101型大孔树脂柱，先用水和10-30%乙醇溶液洗脱，再用85%乙醇溶液洗脱，收集85%乙醇洗脱液；

（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:3-5，以氯仿-甲醇混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；

（5）分出结晶，丙酮重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得可食当归素Ⅴ无色针晶。

所述步骤（1）中超临界二氧化碳萃取温度为30-45℃，压力为15-22MPa，萃取时间为0.5-1h。

所述步骤（4）中氯仿-甲醇混合溶液体积比为1:1-7。

综上所述，本发明存在以下优点：

（1）采用超临界二氧化碳萃取技术脱除油脂类物质，快速、高效。

（2）采用超声循环提取的方法，提取效率高。

（3）采用大孔树脂和硅胶短粗柱层析后进行结晶，从而获得含量95%以上的可食当归素Ⅴ，成本低，分离效果好。

下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

具体实施方式

实施例1：

取可食当归果实粗粉500g，采用超临界二氧化碳技术萃取可食当归果实中的油脂类物质，萃取温度为30℃，压力为22MPa，萃取时间为1h，残渣加9倍（V/W）90%乙醇溶液进行超声循环提取2次，每次1h，合并提取液，浓缩后上D101型大孔树脂柱，先用水和30%乙醇溶液洗脱，再用85%乙醇溶液洗脱，收集85%乙醇洗脱液，浓缩，与100目的硅胶按重量比1:1拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:5，以氯仿-甲醇混合溶液为洗脱剂，依次按1:1、1:4、1:7体积比进行洗脱，收集含可食当归素Ⅴ的洗脱液，回收试剂，将所得可食当归素Ⅴ浓缩液置于结晶罐中静置20小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得可食当归素Ⅴ无色针晶159mg，纯度为96.7%。

实施例2：

取可食当归果实粗粉500g，采用超临界二氧化碳技术萃取可食当归果实中的油脂类物质，萃取温度为40℃，压力为20MPa，萃取时间为0.5h，残渣加8倍（V/W）80%乙醇溶液进行超声循环提取2次，每次1h，合并提取液，浓缩后上D101型大孔树脂柱，先用水和30%乙醇溶液洗脱，再用85%乙醇溶液洗脱，收集85%乙醇洗脱液，浓缩，与200目的硅胶按重量比1:1拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:5，以氯仿-甲醇混合溶液为洗脱剂，依次按1:1、1:3、1:7体积比进行洗脱，收集含可食当归素Ⅴ的洗脱液，回收试剂，将所得可食当归素Ⅴ浓缩液置于结晶罐中静置24小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得可食当归素Ⅴ无色针晶146mg，纯度为95.4%。

实施例3：