[发明专利]西藏绵头雪兔子提取物在缓解果蝇肠道炎症中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及西藏绵头雪兔子提取物在缓解果蝇肠道炎症方面的应用，涉及果蝇天然免疫技术领域。

背景技术

肠粘膜每天接触大量的食物、细菌和病毒等不同的抗原类物质，在肠道中，对病原微生物产生免疫反应以及在消除病原微生物的同时，对食物抗原及其它正常的肠腔内容物产生免疫耐受等，都需肠粘膜屏障发挥作用。对抗病原微生物的肠粘膜免疫可分为先天性免疫和后天获得性免疫，其中先天性免疫构成肠粘膜屏障的基础。肠道先天性免疫是肠道重要的防御机制，是宿主抵御病原微生物和有害物质的第一道防线。

果蝇缺乏哺乳动物所具有的获得性免疫系统，即体内没有T细胞和B细胞，也没有抗体和补体系统，只能通过天然免疫系统对病原微生物的侵染做出应答。另外，果蝇和哺乳动物的肠道具有相似的结构和功能；肠道干细胞的分化机制以及天然免疫机制也十分相似。因此可以利用果蝇作为研究哺乳动物免疫反应的模型，更重要的是可以利用其揭示与人类相关疾病的产生。当果蝇肠道受到外界环境刺激时，其肠道上皮细胞会对内部和外部因子做出应答，如产生活性氧(reactive oxygen species,ROS)和各种抗菌肽(antibacterial peptides)来清除入侵的病原微生物，从而维持其肠道内环境稳态。

绵头雪兔子(Saussurea laniceps Hand.-Mazz.)为菊科风毛菊属植物，又名绵头雪莲花、麦朵刚拉（西藏），具有解毒除湿之功效，用于治疗风湿痹症、通经、癫痫等。绵头雪兔子含有芹菜素、紫丁香苷、β-谷甾醇、伞形花内酯、雪莲内酯等物质。其中，芹菜素具有抗氧化、清除自由基、抗肿瘤和抗炎等作用；紫丁香苷具有增强免疫力、抗氧化以及抗抑郁等作用；β-谷甾醇是一种良好的抗氧化剂，具有很好的清除自由基的能力。因而绵头雪兔子具有潜在的消炎止痛，抗氧化，清除自由基等作用，而目前尚未有对西藏绵头雪兔子提取物用于缓解肠道炎症的相关报道。

发明内容

本发明的目的是揭示出西藏绵头雪兔子提取物在缓解肠道炎症中的应用。

本发明的上述目的是通过如下方案予以实现的：

首先分别利用病原微生物Beauveria bassiana的孢子、盐离子NaCl、表面活性剂SDS和重金属KAl(SO₄)₂喂食果蝇来建立果蝇肠道免疫功能损伤模型，即诱发果蝇肠道炎症，将西藏绵头雪兔子提取物进行果蝇生存率、肠道上皮细胞免疫化学染色和肠道形态学观察等实验，结果发现该提取物具有很好的抗炎、抗氧化、清除自由基等活性，可用于制备抗炎镇痛药物，尤其是治疗肠道炎症的药物。

附图说明

图1为西藏绵头雪兔子提取物对B.bassiana孢子感染后果蝇生存率的影响；

图2为西藏绵头雪兔子提取物对NaCl、SDS和KAl(SO₄)₂处理后果蝇生存率的影响；

图3为西藏绵头雪兔子提取物对NaCl和SDS处理后果蝇肠道上皮细胞的影响；

图4为西藏绵头雪兔子提取物对SDS处理后果蝇肠道形态和肠道壁厚度的影响。

具体实施方式

下面结合实例对本发明作进一步说明：

实验动物：野生型黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)W¹¹¹⁸为实验室保存，培养温度(25±1)℃、相对湿度60%～70%。

果蝇培养基的配制：对照组培养基配方为玉米粉14.2g、琼脂1.1g、酵母粉3.3g、大豆粉1.9g、白糖17g、丙酸0.94mL、去离子水200mL。实验组中加入与对照组去离子水等体积的绵头雪兔子提取液，实验组中绵头雪兔子提取物的浓度分别为2.5%和5%。

本实施例涉及的各实验试剂均为市售分析纯：NaCl、SDS、KAl(SO₄)₂、胰蛋白胨和酵母提取物等。

实施例1西藏绵头雪兔子提取液的制备

取西藏绵头雪兔子20g，剪碎，加入400mL去离子水浸泡24h，加热微沸3h，过滤，再加入400mL去离子水用同样的方法提取2次，合并3次提取的滤液并加热浓缩至200mL，即得到质量浓度为0.1g·mL^-1的绵头雪兔子提取液，置4℃保存备用。

实施例2西藏绵头雪兔子提取物对B.bassiana孢子感染后果蝇生存率的影响