[发明专利]一种毛发的前处理方法

说明书

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种适用于检测毛发中滥用药物的毛发前处理方法。

背景技术

目前，日趋严重的毒品问题已成为全球性的灾难。毒品的泛滥直接危害人民的身心健康，并给经济发展和社会进步带来巨大的威胁。据联合国的统计表明，全世界每年毒品交易额达5000亿美元以上，毒品蔓延的范围已扩展到五大洲的200多个国家和地区，而且全世界吸食各种毒品的人数已高达2亿多，其中17～35周岁的青壮年占78％。另一方面，近几年来随着世界各国特别是欧盟、日本、美国等发达国家对食品中药物残留的要求日趋严格，随着仪器设备检测能力和检测技术水准的提高，对动物的药物最高残留限量的要求也越来越严格。

药物滥用一般是指违背了公认的医疗用途和社会规范而使用任何一种药物。这种使用往往是自行给药，因而对用药者的健康和社会都会造成一定损害。一般常见的药物滥用是指：麻醉药品，如阿片类、可卡因类、大麻类等；精神药品，包括中枢抑制剂，如镇静催眠药，还有中枢兴奋剂，如咖啡因，此外还有致幻剂，如麦司卡林、LSD等；抗生素药品，如青霉素，庆大霉素等；β类兴奋剂药品，如常见的瘦肉精等；以及同化激素和皮质激素等等。

常用的生物检材如血、尿、胆汁等没有一种可提供像毛发一样长程的用药信息。体液(主要指尿液和血液)仍是药物滥用检验较好的生物检材，但体液中药物的检出时限短、检材不易保存，只能提供个体短期使用药物的信息；而毛发取材容易、无创，携带方便，易长期保存，且药物在毛发中代谢较慢可长期存在，因此毛发分析在鉴定滥用药物方面要比体液分析更实用、方便。十年来，毛发分析技术飞速发展，由于毛发检材本身所具有的独特的优势，人以及动物毛发中滥用药物的检测已开始受到越来越多的关注。很多国家的法化学实验室，毛发分析已成为药物滥用检测的常规操作，并已得到了法庭的承认、采纳。

毛发的前处理一般分为两步：清洗毛发；毛发的消化、提取。

毛发的清洗：毛发与外界环境接触，易受污染。就外部污染而言，毛发可分为3个区域：易接触区、半接触区和不可接触区。易接触区是指毛发的表面最外层，容易沾上环境中的污物，甚至药物的粉末，该区采用一些无水有机溶剂洗净；半接触区是指污染物不易进入、而需以水溶液形式能进入的区域，该区需用水或亲水的有机溶剂等洗涤；非接触区是最大的区域，通常占毛发结构的90％左右，是药物与毛发结合的主要区域，洗涤溶剂不能进入该区。毛发的消化、提取：药物固化于毛发的变性角蛋白中，须先消化使其呈游离态再提取。毛发剪碎或磨碎后可增大其表面积，有利于药物的释放。常用的消化方法有碱水解、酸水解、酶水解、甲醇超声等。但是现有的提取方法，如酸、碱水解法，往往水解条件比较激烈，不适合单乙酰吗啡等不稳定化合物的样品处理；酶水解法适用范围广，释放效率高，缺点是成本过于昂贵；甲醇超声法适用范围较广，但药物释放不完全且杂质较多。因此，由于缺少一种适用范围广、快速、简便、高效而又不对化合物产生影响的毛发前处理方法，毛发分析工作仍然停留在实验室水平，多年未见到实际产品。

因此发明一种简单快速高效的毛发前处理方法，以及相应的检测手段是具有非常重要的现实意义的。

发明内容

本发明针对目前的毛发前处理方法适用范围窄，复杂，低效的问题，提出一种毛发的前处理方法。

一种毛发的前处理方法，按照如下步骤进行：

(1)毛发清洗：用清洁剂清洗，晾干；

(2)毛发粉碎：将毛发粉碎为片段；

(3)毛发消化：将步骤(2)毛发片段，加入消化液中，60-100℃水浴5min-2h，使头发水解，水解完成后将上述消化液静置冷却至室温，取上清液进行检测。

所述消化液的组分为：0.5-5％体积份数的PBS缓冲液，0.1-10mmol／L乙酸钙，1-20mmol／L二硫苏糖醇，0.1-2mmol／L十二烷基硫酸钠和1-10mg／ml蛋白酶K，余量为去离子水。

所述PBS缓冲液的pH为7.2。

所述毛发粉碎的方法为用剪刀剪碎或球磨机磨碎。

所述清洁剂为水、甲醇、十二烷基硫酸钠中的一种及以上。