[发明专利]一种简易的卵巢体外保存方法

说明书

技术领域

本发明属于生殖生物学领域，特别是涉及一种简易的卵巢体外保存方法。

背景技术

体外受精（IVF）与核移植试验使用的卵母细胞大都来自屠宰场的卵巢。理论上，动物宰杀后，最短的时间内采集卵巢，回收卵母细胞效果最好。但实际上，养殖场或屠宰场都与实验室有一定的距离，需要长距离运送，这就存在着卵巢的运输保存方法、温度和时间的问题。一般实验要求将卵巢保存在30～35℃含有双抗的生理盐水中，尽快运回实验室。目前大都通过保温桶运输，即将带有双抗的生理盐水加热后倒入保温桶中保存卵巢。用保温桶不能使生理盐水持续恒温、成本高、携带不方便，而且需要人员事先把生理盐水加热、测定温度后才能保存卵巢，过程繁杂，不便于操作。到现在为止还没有一种更好的保存卵巢的方法。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种简易的卵巢体外保存方法。该保存方法能对常温的生理盐水进行自动恒温加热来保存卵巢，可持续恒温、简单方便、价格低廉。

为实现上述目的，本发明采取如下措施：

本发明所述简易的卵巢体外保存方法为：将来自屠宰场的新鲜动物卵巢放入盛生理盐水的广口聚丙烯（Polypropylene,简称PP）塑料瓶中，盖上盖子；将原料活性炭、还原铁粉、蛭石、NaCl、水按一定比例混合均匀后，密封在用无纺布聚乙烯（polyethylene，简称PE）复合膜制成的三封口袋子中，得原料层；将原料层包裹固定在盛放卵巢的广口PP塑料瓶外表面后，放入单气阀自封密闭袋中并抽出其中的空气，使用的时候拆开封口即可。

在上述卵巢体外保存方法中，原料层可对生理盐水进行自动恒温加热。原料层自动加热原理是铁在潮湿空气中发生吸氧腐蚀反应。即利用铁氧化反应放热来发热。活性炭具有很强的吸附性，在活性炭的疏松结构中储有水蒸气，水蒸气液化成水滴，流出与空气和铁粉接触，在氯化钠的催化作用下较为迅速的发生反应生成氢氧化铁，放出热量。通过铁粉的缓慢氧化放热，再通过原电池原理加速氧化，使化学能转变为电能，然后利用蛭石来保持温度，蛭石是当今世界首屈一指的超级保温材料，故能保温常达8～10小时之久，而且整个过程温度基本恒定。

具体地，本发明所述的卵巢体外保存方法，包括如下步骤：

（1）在广口PP塑料瓶中加入1/3～2/3体积的生理盐水，加入青霉素和链霉素，放入屠宰场新鲜的动物卵巢，然后盖上盖子，得PP塑料瓶I；

（2）将活性炭、还原铁粉、蛭石、NaCl、水混合均匀后，密封在用无纺布PE复合膜制成的三封口袋子中，得原料层；

（3）将步骤（2）所得原料层包裹固定在步骤（1）所得PP塑料瓶I的外表面，得PP塑料瓶II；

（4）将步骤（3）所得PP塑料瓶II放入单气阀自封密闭袋中，并抽出其中的空气，使用的时候拆开封口即可。

在上述卵巢体外保存方法中，所述步骤（1）中生理盐水与动物卵巢体积之比为10︰2～8。

在上述卵巢体外保存方法中，所述步骤（1）中青霉素和链霉素的加入量按照每1000ml生理盐水加入青霉素和链霉素各5～10万IU计算。

在上述卵巢体外保存方法中，所述步骤（2）中活性炭、还原铁粉、蛭石、NaCl和水的质量之比为1～3︰3～4︰1～3︰1～3︰1～2。

本发明所述的卵巢体外保存方法适合于一般哺乳动物卵巢的体外保存，包括山羊、绵羊、牛、猪、骆驼和鹿等动物的卵巢。

本发明的有益效果在于：本发明所述简易的卵巢体外保存方法使用方便、价格低廉、体积小而且能对生理盐水进行持续恒温加热，使放置卵巢的生理盐水稳定地保持在30℃～35℃，保温可长达8～10h，保温效果优于保温桶，而且便于携带。通过此方法可以为科研上利用屠宰场卵巢提供一种简便，温度相对恒定的运输小环境，便于卵巢体外操作。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的发明内容作进一步的详细描述。应理解，本发明的实施例只用于说明本发明而非限制本发明，在不脱离本发明技术思想的情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段，做出的各种替换和变更，均应包括在本发明的范围内。

实施例1

（1）在直径为7cm、高度为8cm的广口PP塑料瓶中加入1/2体积（150ml）的生理盐水，向生理盐水中分别加入青霉素0.8万IU、链霉素0.8万IU，放入30枚（50ml）来自屠宰场的新鲜山羊卵巢，然后盖上盖子，得PP塑料瓶I；