[发明专利]TRADD基因过表达慢病毒在抑制皮肤疤痕形成中的应用

权利要求书

1.TRADD基因过表达慢病毒在抑制皮肤疤痕形成或治疗皮肤疤痕中的应用，其特征在于所述的TRADD基因过表达慢病毒通过如下方法制备而成： 

(1)TRADD基因为模板，采用PCR法扩增目的片段，扩增引物序列为： 

TRADD-F：5’-CTCAAGCTTCGAATTCGCCACCATGGCAGCTGGGCAA AATG-3’； 

TRADD-R：5’-CCATGGTGGCGAATTCGGCCAGGCCGCCATTGG-3’： 

PCR产物回收纯化后与EcoR I酶切线性化的表达载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro进行重组连接，37℃孵育15min，再50℃孵育15min，立即转化DH5a感受态细胞，最后将已转化的感受态细胞转移至含氨苄青霉素的LB琼脂平板上，37℃培养16h； 

(2)接种阳性克隆，保种并分装100μl进行测序，测序验证无误后，接种抽提质粒： 

(3)选择生长状态良好的293FT细胞进行包装：取慢病毒表达载体pLVX-TRADD-EGFP-3FLAG-Puro3μl、virapower packing mix9μl轻柔混合于1.5ml无血清Opti-MEM I中，形成溶液A；将36μlLipofectamine2000与1.5ml无血清Opti-MEM I混合形成溶液B，并室温孵育5min；再将溶液A和B混合，室温孵育20min，形成DNA-Lipofectamine2000复合物，直接转染293FT细胞，转染48h后，收集病毒液。 

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于改善皮肤疤痕的平整度和／或色泽均匀度，优选为同时改善平整度和色泽均匀度。 

3.权利要求1所述的TRADD基因过表达慢病毒。