[发明专利]一株酵母菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一株酵母菌株及其应用，具体地说，涉及一株酵母菌株PA0732-1及其应用。 

背景技术

瓜类细菌性果斑病是近年来新发生并流行开来的一种毁灭性病害。也是世界检疫性病害。2007年5月，我国农业部重新将该病列入《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》中，作为重大检疫性植物病害。该病主要引起西瓜、甜瓜、籽瓜果实的腐烂，导致减产。同时也能危害瓜类子叶、真叶，污染瓜种。具有发病快、防治难、为害重等特点。据不完全统计，全球已有16个国家相继报道了该病的发生，我国已达17个省市发现或报道了该病。其中新疆、内蒙古、甘肃瓜产区危害重大，常年造成10%-30%的减产，发病重的年份，个别地块绝产，严重影响了瓜农种植的积极性，使特色优势产业失去了市场竞争活力。另外瓜类细菌性果斑病对合法种子经销商的利益也不断受到损害，禁售和索赔事件频繁发生，引发一系列社会性问题。有效防治该病成为目前哈密瓜生产中面临的亟待解决的问题。 

哈密瓜细菌性果斑病由燕麦食酸菌西瓜亚种（Acidovorax avenae subsp.citrulli Willems）（Aac）引起，属革兰氏阴性菌，菌体短杆状，属rRNA组I。主要危害厚皮甜瓜、西瓜、籽瓜、南瓜、黄瓜、丝瓜、蜜露洋香瓜和网纹洋香瓜等，也可以感染番茄、胡椒、茄子等，不能侵染玉米、大豆。病菌主要通过伤口和气孔侵染哈密瓜。远距离传播通过调运带菌种子人为传播，病种萌发后病菌先侵染子叶，引起幼苗染病，湿度大时，病斑上形成的菌脓，借助雨水、风、昆虫及农事操作等途径近距离的传播，从而使病菌在田间得以定殖和流行。 

对于瓜类细菌性果斑病的防治，国内外学者也做了大量的研究，虽在一定程度上控制了该病害的发生和蔓延，但成效令人不满意。因此，加强进、出口种子的检疫是预防该病发生的首要措施。对于种子检测，国内外成功建立了多种检测技术体系，如RFLP、PCR产物杂交、PCR产物测序及同源性分析、免疫磁性分离PCR技术等，这些技术能有效地检测和鉴定出病原的种类，而且成效显著。， 但检测后的带菌种子的处理及田间防治研究报道较少。目前国内外防治该病仍依赖稀酸浸种技术，铜制剂和抗生素类化学药剂进行防治。用物理方法处理种子，操作简单，能减轻病害的发生，但不能根除。施用可杀得等铜制剂浓度掌握不当，易造成西瓜和甜瓜药害。运用过量抗生素类化学药剂易造成的果实残留，对部分人群健康有害。应用抗病品种防治该病是最简便、经济、有效的途径，但目前尚未发现有免疫的哈密瓜品种。 

本项目选用了酵母菌作为该病的生防材料，其具有抗逆性强，对环境要求不高，能利用低水平的营养物质迅速繁殖成为主导菌，分泌所产生的胞外多糖具有加强其生存能力和抵制病原菌的侵染作用；受杀虫剂的影响较小；酵母菌的遗传学基础研究的比较清楚，遗传转化系统比较完善，具有通过基因工程技术改造提高防效的潜力；大多数拮抗酵母菌不产生对人体有害的抗菌素，同时可以避免病菌对抗菌素产生抗性而降低生物防治的效果。因此，这些独具优势的特性使酵母菌成为植物病害生物防治的一类极具应用潜能的新资源菌，在今后植物病害防治中起着举足轻重的生防作用，越来越受到人们的重视。 

20世纪50年代以来，酵母菌在植物病害防治领域的研究发展迅速，利用酵母菌防治植物真菌病害的研究已取得了不少的突破性进展，尤其在果蔬采后病害的防治上相关文献报道很多，但对于植物细菌病害防治目前国内外研究少见报道。迄今为止，已报道有20多种酵母菌用于苹果、梨、草莓、柑橘、葡萄、桃、樱桃、油桃、猕猴桃等果实真菌病害的生物防治。一些国家还成功利用酵母菌研制开发了安全有效的生物制剂等，在控制柑橘类和仁果类果实采后腐烂具有很好的防效。利用酵母菌防治病害已逐步发展成为国内外研究的热点。 

发明内容

本发明的目的是克服现有技术所存在的上述不足，而提供一株酵母菌株PA0732-1及其应用。通过从外界环境中经大量的分离、筛选酵母菌，成功获得一株拮抗Aac效果显著的酵母菌株PA0732-1，证明了利用酵母菌可以防治细菌性病害。同时发现酵母菌株0732-1发酵液中存在酸性抑细菌菌物质。利用酵母菌发酵液处理种子，不仅安全环保、效果明显、病原细菌不易产生抗药性，而且不会因处理不当影响种子萌发。另外，施用PA0732-1于田间，易定殖于哈密瓜植株表面，对哈密瓜病害具有很好的预防效果。 

其技术方案为： 

本发明所述酵母菌株分离于石河子西瓜叶片表面，菌株代号为PA0732-1，该菌株于2012年11月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.6840。