[发明专利]负载硫酸庆大霉素/明胶微球复合物的丝素蛋白支架及制备方法

说明书

技术领域

本发明属于高分子材料技术领域，特别涉及一种负载硫酸庆大霉素/明胶微球复合物的丝素蛋白支架及制备方法。

背景技术

皮肤是人体最大的器官，主要分为表皮层、真皮层和皮下组织，对人体具有重要的屏障、机械、感知和调控的功能。但是皮肤是人体最脆弱和最容易受到伤害的器官之一，皮肤溃烂、创伤、手术损伤和烧伤是皮肤受损的重要原因，其中烧伤是皮肤受损的主要原因。据统计，全世界每年死于烧伤的人数约为30万，而我国每年的烧伤患者约为1000万，其中320万需要皮肤移植。感染是制约烧伤皮肤愈合的重要因素，因为感染可以改变创面修复的正常过程，对烧伤和其他创伤类型都非常有害。在烧伤患者中，感染不仅破坏了创面愈合的微环境，有时甚至可以导致严重的全身并发症。据估计烧伤致死率中约有75%是由感染所致。为了解决这个问题，研究人员把目光转向了研发皮肤敷料或者替代物上，希望能够从而降低感染对皮肤伤口带来的问题又或者能够抗感染，促进皮肤伤口愈合。

丝素蛋白是一种疏水性的蛋白质，力学性能优异，结构稳定，具有良好的生物相容性，而且来源丰富，成本低廉，是一种优良的天然的高分子材料。基于丝素蛋白这些优点，其一直广泛运用在组织工程领域上，例如软骨修复、网状结缔组织修复、骨修复和神经修复等方面。有研究表明，用丝素蛋白能够促进成纤维细胞的增值，分化，对皮肤伤口愈合有促进作用，所以丝素蛋白能够作为皮肤敷料使用，但是由于丝素蛋白本身没有抗菌性能，这对丝素蛋白的使用有所限制，因此，制备一种具有抗菌能力的丝素蛋白支架成为亟待解决的问题。

硫酸庆大霉素是一种广谱抗菌素，对革兰氏阳性菌和阴性菌都很有效，广泛应用于敏感菌引起的系统感染或局部感染,但长期服用或者在体内的血药浓度过高，会带来一系列的毒副作用，例如耳中毒、肾中毒、血尿,甚至过敏性休克后导致死亡,降低了临床治疗效果。为了降低硫酸庆大霉素的用药量和在人体的毒副作用，但又保证其药效，以期达到高效、低毒、低残留的目的，必须研发出一种新型的药物载体体系。

明胶，具有良好的生物相容性，已经广泛被运用在生物医学和药物载体等方面上，特别是由明胶制备出来的微球，已经成为了一种很成熟的药物载体体系。

近年来，利用丝素蛋白作为三维支架，在皮肤敷料上的应用和研究成为了热点，有研究表明，用丝素蛋白作为皮肤敷料，在小鼠的全层皮肤损伤的修复实验中，取得很好的效果；而明胶微球早已广泛利用在生物医学和药物载体上；另一方面，如何改善硫酸庆大霉素在人体的投药方式，降低血药浓度和达到缓释的效果，也是研究人员所关注的问题。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种负载硫酸庆大霉素/明胶微球复合物的丝素蛋白支架的制备方法。本发明所述的制备方法是将硫酸庆大霉素与明胶微球复合后负载在丝素蛋白多孔支架上，经过冷冻干燥的方法，形成复合支架。

本发明的另一目的在于提供由上述制备方法得到的负载硫酸庆大霉素/明胶微球复合物的丝素蛋白支架。本发明制备的复合支架具有药物缓释功能，能够降低了由于高的血药浓度带来的对人体的伤害，而且该支架抗菌效果明显。

本发明的再一目的在于提供上述的负载硫酸庆大霉素/明胶微球复合物的丝素蛋白支架的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种负载硫酸庆大霉素/明胶微球复合物的丝素蛋白支架的制备方法，包括如下步骤：

（1）将浓度为10～50mg/ml硫酸庆大霉素溶液滴加到明胶微球中，于4～25℃放置过夜，然后冷冻干燥，得到硫酸庆大霉素/明胶微球复合物；其中每克明胶微球加入硫酸庆大霉素溶液的量为2～10ml；

（2）将步骤（1）的硫酸庆大霉素/明胶微球复合物加入2～10wt%丝素蛋白溶液中，搅拌均匀，然后冷冻干燥，得到负载硫酸庆大霉素/明胶微球复合物的丝素蛋白多孔复合支架；每毫升丝素蛋白溶液加入10mg硫酸庆大霉素/明胶微球复合物；

步骤（1）中：

所述的10～50mg/ml硫酸庆大霉素溶液优选采用以下方法进行制备：将硫酸庆大霉素溶于去离子水中，搅拌均匀，得到浓度为10～50mg/ml硫酸庆大霉素溶液；

所述的明胶微球的粒径优选为5～30μm，膨胀率优选为300～500%；