[发明专利]一种地西他滨中间体的分析检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱分析方法，尤其是一种地西他滨中间体的分析检测方法。

背景技术

地西他滨作为特异的DNA甲基化转移酶抑制剂，可逆转DNA的甲基化过程，激活失活的抑癌基因，适应于各种类型的骨髓增生异常综合症。

1-(2-脱氧-3,5-二-O-芴甲氧羰酰基-D-核糖)-4-氨基-1,3,5-均三嗪-2-酮是合成地西他滨的重要中间体，该化合物以α型和β型异构体的形式存在，其结构式如下：

其中，Fmoc为芴甲氧羰酰基。

到目前为止，USP、EP、BP、JP以及中国药典和文献中均没有记载地西他滨中间体的分析检测方法，但地西他滨中间体的分析检测对反应控制和收率提高有着重要的作用，同时也直接影响着终产品的质量，所以建立一种稳定有效的分析检测方法对地西他滨中间体进行质量控制是非常必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种地西他滨中间体的高效液相色谱分析检测方法，用于地西他滨中间体的质量控制。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验，最终获得如下技术方案：

一种地西他滨中间体的分析检测方法，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱（C18，4.6×250mm，5μm），以甲醇、乙腈和水混合溶液体系为流动相，以检测波长为254nm，进行高效液相色谱法分析检测。

所述的流动相中甲醇：乙腈：水的体积比为30～50:45～25:25。

进一步地，流动相中甲醇：乙腈：水的体积比优选为40:35:25。

本发明所述的分析检测方法，可通过以下步骤实现：

A、取地西他滨中间体样品适量，用乙腈溶解，配制成每1mL含地西他滨中间体0.05～0.7mg的样品溶液；

B、设置流动相流速为0.7～1.2mL/min，检测波长254nm，柱温为25～35℃；

C、取A的样品溶液20μL注入液相色谱仪，完成地西他滨中间体的分析检测；

其中：

高效液相色谱仪：Waters e2695液相色谱系统；

色谱柱：Waters Symmetry C18（4.6×250mm，5μm）；

流动相：甲醇：乙腈：水按体积比40:35:25形成流动相；

检测波长：254nm；

柱温：30℃；

流速：1.0mL/min。

本发明涉及的分析检测方法，可以有效的将地西他滨中间体的α型和β型异构体及其杂质分开，而且该方法线性关系良好，操作简单，重复性及耐用性好，结果稳定可靠，从而可用于地西他滨中间体的质量控制，为最终成品的质量提供有效保障。

附图说明

图1实施例1的地西他滨中间体HPLC图谱。

图2实施例2的地西他滨中间体HPLC图谱。

图3实施例3的地西他滨中间体HPLC图谱。

图4实施例6的地西他滨中间体线性工作曲线。

具体实施方式

以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。

实施例1

仪器与条件：Waters e2695液相色谱系统，Waters2489紫外/可见光检测器，色谱柱：Waters Symmetry C18（4.6×250mm，5μm）；检测波长：254nm；柱温为30℃；流速1.0mL/min；甲醇：乙腈：水按体积比40:35:25作为流动相。

实验步骤：将地西他滨中间体用乙腈溶解并定量稀释制成每1mL中含地西他滨中间体0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液20μL注入液相色谱仪，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图1。

附图1表明，在该色谱条件下，地西他滨中间体两种异构体和杂质峰可以完全分离，且地西他滨中间体两种异构体峰的保留时间在17.55min和22.05min左右。

实施例2

仪器与条件：Waters e2695液相色谱系统，Waters2489紫外/可见光检测器，色谱柱：Waters Symmetry C18（4.6×250mm，5μm）；检测波长：254nm；柱温为25℃；流速0.7mL/min；甲醇：乙腈：水按体积比30:45:25作为流动相。