[发明专利]用于检测小麦抗旱性的引物及其应用有效
申请号: | 201310381510.3 | 申请日: | 2013-08-28 |
公开(公告)号: | CN103451286A | 公开(公告)日: | 2013-12-18 |
发明(设计)人: | 陈东升;张晓科;王宪国;张维军;亢玲;金秀峰;王小亮;何进尚 | 申请(专利权)人: | 宁夏农林科学院农作物研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 750105 宁*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 小麦 抗旱性 引物 及其 应用 | ||
1.用于检测小麦抗旱性的引物对组,由如下引物对A和引物对B组成:
所述引物对A为由序列表中序列1所示的单链DNA和序列2所示的单链DNA组成的引物对;所述引物对B为由序列表中序列3所示的单链DNA和序列4所示的单链DNA组成的引物对。
2.根据权利要求1所述的引物对组,其特征在于:所述引物对组中的四条单链DNA在PCR反应体系中的摩尔比为1:1:1:1。
3.权利要求1或2所述的引物对组在检测小麦抗旱性中的应用。
4.一种检测小麦抗旱性的方法,为如下(a)-(c)中任一种:
(a)包括如下(a1)-(a2)步骤:
(a1)以待测小麦的基因组DNA为模板,以权利要求1或2中所述的引物对A进行PCR扩增,获得PCR产物;
(a2)检测步骤(a1)所得PCR产物的大小,按照如下方法确定所述待测小麦的抗旱性:若所述PCR产物中含有大小为101bp的DNA片段,则所述待测小麦为抗旱性强的小麦或候选为抗旱性强的小麦;若所述PCR产物中含有大小为117bp的DNA片段,则所述待测小麦为抗旱性弱的小麦或候选为抗旱性弱的小麦;
(b)包括如下(b1)-(b2)步骤:
(b1)以待测小麦的基因组DNA为模板,以权利要求1或2中所述的引物对B进行PCR扩增,获得PCR产物;
(b2)检测步骤(b1)所得PCR产物的大小,按照如下方法确定所述待测小麦的抗旱性:若所述PCR产物中含有大小为215bp的DNA片段,则所述待测小麦为抗旱性强的小麦或候选为抗旱性强的小麦;若所述PCR产物中含有大小为219bp的DNA片段,则所述待测小麦为抗旱性弱的小麦或候选为抗旱性弱的小麦;
(c)包括如下(c1)-(c2)步骤:
(c1)以待测小麦的基因组DNA为模板,以权利要求1或2中所述的引物对A和所述的引物对B分别进行PCR扩增,获得PCR产物;
(c2)检测步骤(c1)所得PCR产物的大小,按照如下方法确定所述待测小麦的抗旱性:若采用所述引物对A扩增所得PCR产物中含有大小为101bp的DNA片段,且采用所述引物对B扩增所得PCR产物中含有大小为215bp的DNA片段,则所述待测小麦为抗旱性强的小麦或候选为抗旱性强的小麦;若采用所述引物对A扩增所得PCR产物中含有大小为117bp的DNA片段,且采用所述引物对B扩增所得PCR产物中含有大小为219bp的DNA片段,则所述待测小麦为抗旱性弱的小麦或候选为抗旱性弱的小麦。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述大小为101bp的DNA片段为序列表中序列5所示DNA片段;所述大小为117bp的DNA片段为序列表中序列6所示DNA片段;所述大小为215bp的DNA片段为序列表中序列7所示DNA片段;所述大小为219bp的DNA片段为序列表中序列8所示DNA片段。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于:以所述引物对A进行PCR扩增的退火温度为53℃;以所述引物对B进行PCR扩增的退火温度为53℃。
7.权利要求1-6中任一所述的引物对组或方法在如下(I)-(IV)中的应用:
(I)筛选抗旱性强的小麦品种;
(II)筛选抗旱性弱的小麦品种;
(III)培育抗旱性强的小麦品种;
(IV)培育抗旱性弱的小麦品种。
8.培育抗旱性强的小麦品种的方法,包括采用通过权利要求4-6中任一所述方法检测得到的所述抗旱性强的小麦品种作为亲本进行育种的步骤。
9.培育抗旱性弱的小麦品种的方法,包括采用通过权利要求4-6中任一所述方法检测得到的所述抗旱性弱的小麦品种作为亲本进行育种的步骤。
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