[发明专利]一种胶体金免疫层析试纸检测系统

说明书

技术领域

本发明属生物技术领域，特别是涉及专用的免疫层析分析系统。 

背景技术

PCT是一种蛋白质，当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高。自身免疫、过敏和病毒感染时PCT不会升高。局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致其升高。细菌内毒素在诱导过程中担任了至关重要的作用。 

PCT反映了全身炎症反应的活跃程度。影响PCT水平的因素包括被感染器官的大小和类型、细菌的种类、炎症的程度和免疫反应的状况。另外，PCT只是在少数患者的大型外科术后1～4d可以测到。 

PCT水平的升高出现在严重休克、全身性炎症反应综合征(SIRS)和多器官功能紊乱综合征(MODS)，即使没有细菌感染或细菌性病灶。但是，在这些病例中PCT水平通常低于那些有细菌性病灶的患者。从肠道释放细胞因子或细菌移位可能引起诱导。 

目前，检测PCT的实验室方法有很多，不仅可以定性，亦可以定量。常用的方法有如下几种：1.放射免疫学分析法：利用人工合成的多克隆抗体特异地识别和连接合成氨基酸降钙素原。该方法能检测正常人的血清PCT，可靠敏感度为4pm／mL，检测的是游离PCT、结合型PCT和降钙素基因相关肽前体的混合物，而不能区分上述三种物质。该法检测耗时长(19～22h)，而且有放射性元素的污染使用受到限制。2.双抗夹心免疫化学发光法(ILMA)：运用双单克隆抗体，其中一个抗体为降钙素抗体，另一个为抗钙素抗体，分别结合到PCT分子的降钙素和抗钙素部位，可排除交叉反应。其中一个抗体是光标记的，另一个未标记的抗体固定在试管的内壁，反应过程中两个抗体与PCT分子结合而形成三明治复合体，发光部位于反应管的表面。该法操作简便，特异性强，敏感性高，测定的低限值为0.1ng/mL，2h可以出结果。3.胶体金比色法(B.R.A.H.M.S PCT-Q-半定量快速实验)：采用胶体金技术，包括胶体金标记的抗抗钙素的单克隆抗体和用作包被的抗降钙素多克隆抗体，当标本(血清或血浆)加入标本孔，金标单克隆抗体与标本中的PCT结合，形成金标记的抗原抗体复合物。该复合物在反应膜上移动，与固定在膜上的抗降钙素抗体结合形成更大的复合物。当PCT浓度超过0.5ng/mL，该复合物显示红色，红色的深浅与PCT的浓度成正比，与标准比色板比较即可得出PCT的浓度范围。结果分为四级：正常<0.5ng／mL；轻度升高>0.5ng/mL；明显升高>2ng/mL；显著升高>10ng／mL。该法具有快速简便，易观察的特点。4.透射免疫浊度法：样品中的PCT与试剂中的PCT单克隆抗体发生抗原-抗体反应，使反应液浊度增加，并在一定范围内反应液浊度与所加人抗原的量呈线性关系，可使用生化分析仪或其它光学检测仪器在600nm波长处测定反应液吸光度值，反应液吸光度值与所测PCT浓度成正比。该测定方法简便、快速，可自动化，适合于批量检测。2005年国内已有研制开发的PCT免疫比浊试剂盒供应，为PCT的广泛应用提供了方便条件，但免疫透射比浊的方法学及临床应用尚需做进一步的验证。 

免疫层析方法是20世纪90年代兴起的一种将免疫技术和色谱层析技术相结合的固相膜免疫分析方法，由这一技术开发出来的胶体金免疫层析试纸现已广泛应用于医学检验、食品安全监测、出入境检验检疫等领域。但现有的胶体金免疫层析诊断试剂多用于定性测定，不能满足临床对某些指标量化的要求。 

因此，本研究开发的胶体金免疫层析试纸检测系统，研制出PCT免疫层析快速定量检测系统。该检测系统以特定波长的激光器为光源，通过测量试剂检测带和质控带对特定波长光线的吸收光密度来实现对试剂的定量测定。其内部集成了光学系统、计算机控制系统、可充电电池、微型打印机和液晶显示屏等部件，是一种便携式的快速检测仪器。具有在15min内完成对PCT的快速定量测定；该检测系统具有简便、快速、便携等特点，可有效用于评价严重炎症性疾病临床进程及预后、动态监测细菌性感染伴随系统性炎症反应，弥补了临床现有方法的不足，适合于各级医院及基层、社区医疗机构使用，具有很高的临床应用价值。 

发明内容

本发明通过提供一种胶体金免疫层析试纸检测系统。