[发明专利]雷公藤多指标活性成分的提取条件优化方法及提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种雷公藤多指标活性成分的提取条件优化方法及雷公藤活性成分的提取方法。

背景技术

雷公藤在中医临床上具有悠久的使用历史，主要用于治疗各种免疫和炎症性疾病，包括类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。雷公藤活性成分具有很好的抗肿瘤、免疫抑制、抗炎、抗生育、杀虫等活性。雷公藤内酯醇（即雷公藤甲素）是雷公藤中研究最多、活性最好的成分，具有很好的抗肿瘤、免疫抑制、抗炎、抗生育、杀虫等活性。雷公藤内酯酮与雷公藤内酯醇结构相似，活性也相当。雷公藤红素具有很强的抗肿瘤及较好的免疫抑制等活性。去甲泽拉木醛具有较强的免疫抑制作用。因此这四个指标活性成分已经能够反映雷公藤的整体活性。目前国内外对这些活性成分的研究已成热点，主要集中在通过结构改造等进行创新药物的研发，因此提取分离这些雷公藤活性成分具有重要意义。

雷公藤传统的提取方法有煎煮法、回流法、浸渍法、渗漉法。近年来一些新的提取法，如超声波提取法、超临界萃取法和破碎提取法等，也越来越受到关注。但是在现有雷公藤提取工艺中，一般只选用单个指标成分，不能衡量提取物的整体组成；也有一些对一类成分如总内酯、总生物碱的提取报道，但提取目标缺乏针对性、提取药液杂质多；一般很少采用实验优化设计，从而无法判定提取工艺是否为最优、是否科学合理。

星点设计是在析因设计的基础上，由析因点及中心点形成的可进行线性或非线性拟合的实验设计方法，具有实验次数少、精度高等特点。响应面法是根据几个变量与一个或多个应变量之间的回归关系，通过回归分析得到提取条件和结果的回归关系，从而求得最佳提取工艺的一种数学优化方法，具有科学直观、方便有效等特点。

超声波提取技术是利用超声波的空化作用及超声波次级效应使植物有效成分快速溶出，具有提取简易、效率高、能耗低、不破坏有效成分等特点。

发明内容

为了解决上述问题本发明提供一种运用星点设计-响应面法优化雷公藤多指标活性成分的超声提取工艺，选取液料比、溶剂浓度和超声功率三个对雷公藤多指标活性成分的OD值影响较大的因数进行优化，得到最佳提取工艺参数。

本发明涉及一种雷公藤多指标活性成分的提取条件优化方法，其特征在于：

1．针对雷公藤多指标活性成分的最优化提取，所提取优化的雷公藤多指标活性成分可以为雷公藤内酯醇、雷公藤内酯酮、雷公藤红素和去甲泽拉木醛中的两种或三种以上成分。

2．运用星点设计-响应面优化法优化雷公藤多指标活性成分的超声提取工艺，按以下步骤进行：

1)综合现有技术中的雷公藤活性成分的超声提取工艺为：取雷公藤药材根的粉末，采用甲醇、乙酸乙酯、乙腈中的一种或两种以上成分混合溶液提取，按照提取溶液与粉末为1:1～80:1的液料比，于50～400W功率下超声提取5～60分钟；固液分离，得含有雷公藤活性成分的提取液；

2）提取工艺中单因数实验考查：

当其它因数在较优水平范围时，改变某一因素，例如：

当提取溶剂为乙酸乙酯甲醇混合溶液，液料比在16:1～48:1，超声功率在100～400W，提取时间在15～45分钟的较优水平范围时，乙酸乙酯甲醇混合溶液中乙酸乙酯体积浓度在0～100%范围内分散选取5个或6个以上点值作为实验水平，进行单因素实验；

当提取溶剂为乙酸乙酯甲醇混合溶液，乙酸乙酯体积浓度在50～100%，超声功率在100～400W，提取时间在15～45分钟的较优水平范围时，液料比在1:1～80:1范围内分散选取8个或9个以上实验水平，进行单因素实验；

当提取溶剂为乙酸乙酯甲醇混合溶液，乙酸乙酯体积浓度在50～100%，液料比在16:1～48:1，提取时间在15～45分钟的较优水平范围时，超声功率在50～400W范围内分散选取5个或6个以上实验水平，进行单因素实验；

当提取溶剂为乙酸乙酯甲醇混合溶液，乙酸乙酯体积浓度在50～100%，液料比在16:1～48:1，超声功率在100～400W的较优水平范围时，提取时间在5～60分钟范围内分散选取6个或7个以上实验水平，进行单因素实验；

按实验超声提取后固液分离，得含有雷公藤活性成分的提取液；提取液过滤膜后即用于液相色谱串联质谱检测；计算OD值，OD值越高，表明提取率越高，对应的提取工艺参数越优；进行数据分析处理（如图2）；