[发明专利]一种无动物来源成分的细胞培养用微载体及其制备方法无效
申请号: | 201310377955.4 | 申请日: | 2013-08-27 |
公开(公告)号: | CN103436486A | 公开(公告)日: | 2013-12-11 |
发明(设计)人: | 齐念民;冯见;陈彦田 | 申请(专利权)人: | 上海瀚正生物技术服务有限公司 |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 胡晶 |
地址: | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 动物 来源 成分 细胞培养 载体 及其 制备 方法 | ||
1.一种无动物来源成分的细胞培养用微载体,由配基和三维载体基质通过交联剂交联而成,其特征在于,所述配基为氨基酸聚合物或者人工合成的多肽或者促细胞粘附蛋白,所述配基交联于所述三维载体基质的表面。
2.如权利要求1所述的无动物来源成分的细胞培养用微载体,其特征在于,所述三维载体基质的材料选自葡聚糖,壳聚糖,海藻酸钠,聚2-羟乙基甲基丙烯酸中的一种或几种。
3.一种无动物来源成分的细胞培养用微载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1) 采用表面化学修饰试剂处理三维载体基质,在其表面生成活性基团;
2) 在步骤1)的三维载体基质的活性基团上接枝含环氧基团的聚合物;
3) 在步骤2)的三维载体基质的含环氧基团的聚合物上接枝配基原料,所述配基原料为天然精氨酸、全人工合成的多聚精氨酸,或者人工合成的多肽,或者促细胞粘附蛋白,得到所述微载体。
4.如权利要求3所述的无动物来源成分的细胞培养用微载体的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中,三维载体基质表面的活性基团包括卤代原子、氯甲基、溴甲基、氨基中的一种或几种。
5.如权利要求4所述的无动物来源成分的细胞培养用微载体的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中,所述表面化学修饰试剂选自2-氯丙酰氯、2-溴丙酰溴、2-溴丁酰溴、3-氨甲基硅烷、2-氯丁酰氯中的一种或几种。
6.如权利要求3所述的无动物来源成分的细胞培养用微载体的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中,采用原子转移自由基聚合ATRP方法在三维载体基质的活性基团上接枝含环氧基团的聚合物。
7.如权利要求3中所述的无动物来源成分的细胞培养用微载体的制备方法,其特征在于,所述步骤3)中,配基通过开环反应的方法接枝于三维载体基质的含环氧基团的聚合物上。
8.如权利要求6所述的无动物来源成分的细胞培养用微载体的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中,ATRP接枝反应过程中,催化剂选自溴化铜、氯化铜、溴化亚铜、氯化亚铜中的一种或几种,催化剂配体选自五甲基二乙烯三胺、联吡啶中的一种或两种。
9.一种权利要求1-8中任一项所述的无动物来源成分的细胞培养用微载体用于细胞培养的用途。
10.一种权利要求1-8中任一项所述的无动物来源成分的细胞培养用微载体用于细胞培养的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1) 微载体的灭菌和预处理;
2) 接种细胞并培养;
3) 在细胞培养装置中培养扩增细胞;
4) 细胞收获,分离细胞和微载体。
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