[发明专利]一株可降解吡啶的根瘤杆菌、选育方法及其应用有效

专利信息
申请号: 201310374832.5 申请日: 2013-08-23
公开(公告)号: CN103540544A 公开(公告)日: 2014-01-29
发明(设计)人: 沈锦优;王连军;张鑫;陈丹;孙秀云;李健生;刘晓东 申请(专利权)人: 南京理工大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N1/02;C02F3/34;C12R1/41;C02F101/38
代理公司: 南京理工大学专利中心 32203 代理人: 朱显国
地址: 210094 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一株可 降解 吡啶 根瘤 杆菌 选育 方法 及其 应用
【权利要求书】:

1.一株可降解吡啶的根瘤杆菌,其特征在于它于2013年3月28日在中国典型培养物保藏中心CCTCC保藏,保藏单位地址为中国湖北省武汉市武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M2013110,命名为根瘤杆菌NJUST18,其分类命名为(Rhizobium sp.),GenBank登陆号为JN106368。

2.根据权利要求1所述的可降解吡啶的根瘤杆菌,其特征在于所述的根瘤杆菌菌落特征和生理生化特征为:呈白色,圆形,边缘整齐,光滑湿润,该菌株细胞呈短杆状,表面光滑,以周生鞭毛运动,不形成芽孢,尺寸为2-3μm×0.8-0.9μm;革兰氏阴性,催化酶阴性,氧化酶阴性,接触酶阴性,尿素酶阴性。

3.一种如权利要求1所述的可降解吡啶的根瘤杆菌的选育方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)菌株的分离:将长期受到吡啶污染的排污口取出的土样2g加入到50mL含500mg/L吡啶的液体无机盐培养基MSM中,装入150mL三角瓶中,30℃条件下以180转/分的转速摇床培养进行富集培养;7天后,2mL富集培养后的液体培养基转接入50mL新鲜液体无机盐培养基MSM中,并摇床培养;经过连续3次转接后,用无菌蒸馏水将转接后的液体培养基稀释105-109倍,涂布于含1000mg/L吡啶的无机盐固体培养基平板上,放入30℃培养箱中进行培养;一周后挑取在菌落特征上有明显差异的菌落,采用平板划线分离的方法进行纯化,连续纯化三次后,得到单一菌株,并进行斜面保存。

(2)菌株的筛选:挑取分离所得到的单菌落,分别接种于含1000mg/L吡啶的无机盐液体培养基中,摇床培养120h;测定培养基中吡啶浓度变化,选取培养基中吡啶浓度显著降低的单菌落。

4.一种利用权利要求1所述的可降解吡啶的根瘤杆菌在吡啶废水治理中的应用。

5.根据权利要求4所述的可降解吡啶的根瘤杆菌在吡啶废水治理中的应用,其特征在于所述的吡啶废水的pH值为5-8,废水中吡啶浓度不超过2600mg/L。

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