[发明专利]一种中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-2及其建立方法

权利要求书

1.中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-2的建立方法，其特征在于，包括如下具体步骤：

A）采用组织块贴壁法进行舌部鳞状上皮细胞癌细胞的原代培养；

B）当细胞密度达到约80%的时候进行传代培养；

C）将传代稳定的细胞经RT-PCR检测表明细胞表达人舌部鳞状上皮细胞癌细胞标志性分子CK8、18、19；

D）经免疫印迹实验检测贴壁细胞表达人舌部鳞状上皮细胞癌细胞标志性分子CK8、18蛋白，由此从分子水平上证明成功建立中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-2, 获得的CTSC-2保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC NO：C2012177。

2.如权利要求1所述的中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-2的建立方法，其特征在于，步骤A的具体方法为：

1）I型胶原包被培养皿，室温静止1h 以上，1×PBS 洗皿一次，待用；

2）准备培养液，放于37℃恒温水浴锅中温育10 分钟；

3) 在超净台中取出舌部鳞状上皮细胞癌组织，在酒精中消毒不超过10 秒，在1×PBS 中浸泡一下，除去不需要的部位，放到培养液中；

4）将口腔组织剪成小碎块，均匀分种入培养皿中，加入适量培养液，使组织一半浸于培养液中；

5）置于37 ℃，5%CO₂ 的培养箱中培养；

6）第二天补充适量培养液至稍稍浸没组织块；

7）视细胞生长情况进行适当换液。

3.如权利要求1所述的中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-2的建立方法，其特征在于，步骤B的具体方法为：

1）弃培养液，用1×PBS 洗一次，加入胰蛋白酶消化；

2）加入血清终止消化；

3）吹打细胞，置于离心管中，加入适量的培养液吹打；

4）离心1000rpm，5min；

5）弃上清，加入适量培养液吹打散；

6）将细胞悬液加入新的培养皿中，得到所述中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-2。

4.如权利要求1所述的中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-2 在研究治疗人舌部鳞状上皮细胞癌的药物中的用途。

5.如权利要求1所述的中国人舌部鳞状上皮细胞癌细胞系CTSC-2 在治疗人舌部鳞状上皮细胞癌的药物中的用途。