[发明专利]一种促进茶叶农药残留降解的复合微生态制剂有效
申请号: | 201310374344.4 | 申请日: | 2013-08-23 |
公开(公告)号: | CN103436470A | 公开(公告)日: | 2013-12-11 |
发明(设计)人: | 陈琳;莫艳华;秦火保;周世须 | 申请(专利权)人: | 福州大用生物应用科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/18;A01N25/32;C12R1/07;C12R1/02;C12R1/865;C12R1/225;C12R1/01 |
代理公司: | 福州市鼓楼区京华专利事务所(普通合伙) 35212 | 代理人: | 宋连梅 |
地址: | 350000 福建省福州市仓山*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 促进 茶叶 农药 残留 降解 复合 生态 制剂 | ||
1.一种促进茶叶农药残留降解的复合微生态制剂,其特征在于:其制备方法的具体步骤如下:
(1)原菌种斜面培养:将冷冻保藏管中的芽孢杆菌、醋酸杆菌、酿酒酵母、乳酸杆菌、及蓝藻分别在斜面中活化,之后分别置于90mm培养皿中进行纯化,得芽孢杆菌斜面菌种、醋酸杆菌斜面菌种、酿酒酵母斜面菌种、乳酸杆菌斜面菌种、及蓝藻斜面菌种,备用;
(2)原菌种液体培养:将芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅰ中,之后置于30℃下好氧培养1-2天得芽孢杆菌原菌液;将醋酸杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅱ中,接着于30℃下好氧培养1-2天得醋酸杆菌原菌液;将酿酒酵母斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅲ中,接着于28-30℃下好氧培养3天得酿酒酵母原菌液;将乳酸杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅳ中,之后于37℃下厌氧培养1-2天得乳酸杆菌原菌液;将蓝藻斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅴ中,接着置于28-30℃下且荧光灯每天照射10-14小时,好氧培养3-5天,得蓝藻原菌液;(3)一级种子培养:将芽孢杆菌原菌液、醋酸杆菌原菌液、酿酒酵母原菌液、乳酸杆菌原菌液、及蓝藻原菌液按2:2:2:1:1的菌量比接种于已灭菌的发酵培养基Ⅰ中进行培养,具体地:先接种芽孢杆菌原菌液、醋酸杆菌原菌液、酿酒酵母原菌液、蓝藻原菌液,并于28℃-30℃好氧培养3天,然后再接种乳酸杆菌原菌液,于37℃厌氧培养3天,得复合微生态制剂的一级种子;
(4)二级种子培养:将所得的一级种子按5%的接种量接种于已灭菌的发酵培养基Ⅱ中,并于28-30℃下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天,得复合微生态制剂的二级种子;
(5)成品培养:将所得的二级种子按5%的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ中,并于28-30℃下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天,获得复合微生态制剂的成品。
2.根据权利要求1所述的一种促进茶叶农药残留降解的复合微生态制 剂,其特征在于:所述步骤(1)中芽孢杆菌在斜面中活化的具体操作为:用接种环将芽孢杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅰ上,之后于30℃好氧培养1-2天;所述斜面培养基Ⅰ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min;且该斜面培养基Ⅰ的组分:蛋白胨30克、葡萄糖1克、牛肉膏5克、氯化钠5克、琼脂15克、水1000ml、PH7.2。
3.根据权利要求1所述的一种促进茶叶农药残留降解的复合微生态制剂,其特征在于:所述步骤(1)中醋酸杆菌在斜面中活化的具体操作为:制备斜面培养基Ⅱ,并将斜面培养基Ⅱ置于121℃下灭菌20min,接着冷却至60℃以下加入无水乙醇,且每1000ml斜面培养基Ⅱ需加入100ml无水乙醇,之后用接种环将醋酸杆菌接种于斜面培养基Ⅱ上,然后于30℃下好氧培养1-2天;所述斜面培养基Ⅱ的组分:酵母粉10克、葡萄糖10克、磷酸氢二钾0.5克、硫酸镁0.5克、琼脂20克、水1000ml、PH5.5。
4.根据权利要求1所述的一种促进茶叶农药残留降解的复合微生态制剂,其特征在于:所述步骤(1)中酿酒酵母在斜面中活化的具体操作为:用接种环将酿酒酵母接种于已灭菌的斜面培养基Ⅲ上,之后于28-30℃下好氧培养3天;所述斜面培养基Ⅲ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为30min;且该斜面培养基Ⅲ的组分:马铃薯200克、蔗糖20克、琼脂15-20克、水1000ml、PH自然。
5.根据权利要求1所述的一种促进茶叶农药残留降解的复合微生态制剂,其特征在于:所述步骤(1)中乳酸杆菌在斜面中活化的具体操作为:用接种环将乳酸杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅳ上,之后于37℃下厌氧培养1-2天;所述斜面培养基Ⅳ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min;且该斜面培养基Ⅳ的组分为:蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸钠5克、柠檬酸二胺2克、吐温801克、磷酸氢二钾2克、硫酸镁0.58克、硫酸锰0.28克、琼脂15克、水1000ml、PH6.8。
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