[发明专利]铬离子快速检测金标试纸及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于免疫学和卫生检验学技术领域，特别是涉及一种用于快速检测铬离子的金标试纸及其制备方法与应用。

背景技术

铬是自然界中广泛存在的一种元素，分布于土壤、大气、水及生物体中，主要以三价铬（Cr³⁺）和六价铬（Cr⁶⁺）的形式存在。铬是人和动物体必须微量元素之一，Cr³⁺具有葡萄糖耐量因子（GTF）的活性，参与调节生物体内胆固醇和糖代谢作用，Cr³⁺缺乏会使机体血管内壁的脂肪产生沉积而导致动脉硬化。但Cr³⁺和Cr⁶⁺又是毒性物质，Cr⁶⁺的毒性是Cr³⁺毒性的100倍，许多研究证实，Cr³⁺具有致癌性和诱发基因突变的毒性作用；Cr⁶⁺具有致癌毒性、黏膜毒性、肝肾毒性。因此，我国《生活饮用水卫生标准》规定饮用水铬离子含量不得超过50ng/mL，食品铬含量（GB14961-94）粮食食品不超过1000 ng/mL，果蔬食品不超过500 ng/mL，动物性食品肉蛋不超过1000ng/mL，铬离子是食品安全监管的重点对象。

由于铬具有良好的性能，在电镀、电池、汽车、航空、颜料、油漆、印刷、塑料等行业中发挥着重要作用，铬环境污染日趋严重，对人体健康的危害也愈来愈大，铬污染超标事件屡有发生，已成为环境污染的公害之一。2011年8月，曲靖铬渣污染事件，地下水的出水口检测出的六价铬含量超标200多倍；2012年4月，铬超标药用胶囊事件造成经济损失达160余亿元。

目前，已建立的食品铬检测技术主要有石墨炉原子吸收光谱法（GFAAS）、火焰原子吸收光谱法（FAAS）、电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）、电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）、氢化物发生-原子荧光光谱法（HG-AFS）、电化学分析法等，但这些理化分析方法需要昂贵的仪器设备和熟练的专业人员，检测烦琐费时、周期长，费用高，不能现场操作，样品筛检量小等，其应用受到限制。

因此，研制快速、简便、敏感、特异、经济、筛检量大的铬离子快速检测技术，对于减少环境污染、提高食品质量、保障食品安全具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题：针对现有铬离子检测技术的不足，提供一种能够快速、简便、敏感、特异的用于快速检测铬离子的金标试纸；

还提供了铬离子金标试纸的制备方法及其应用。

本发明的技术方案：

一种用于快速检测铬离子的金标试纸，底层为支撑层，中间层为吸附层，保护膜固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为样品垫、金标抗体结合垫、纤维素膜层及手柄端的吸水垫，其中在纤维素膜层上设有偶联铬离子的载体蛋白溶液印制的检测印迹和用兔抗或羊抗小鼠IgG抗体溶液印制的对照印迹；所述金标抗体结合垫中包被有胶体金标记的特异性铬离子单克隆抗体。

所述纤维素膜层用硝酸纤维素膜、纯纤维素膜或羧化纤维素膜制成；所述样品垫和金标抗体结合垫用聚偏二氟乙烯膜、尼龙膜、玻璃纤维棉或聚酯膜制成；吸水垫用吸水滤纸制成，支撑层用不吸水的韧性材料制成。

所述                                                偶联铬离子的载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、钥孔戚血蓝蛋白、人血清白蛋白和兔血清白蛋白中的一种；检测印迹上偶联铬离子的载体蛋白包被量为1 μL/cm，载体蛋白浓度为1 mg/mL；对照印迹上兔抗或羊抗小鼠IgG抗体溶液的包被量为1 μL/cm，抗体浓度为1 mg/mL；所述检测印迹和对照印迹为平行排列的“︱︱”直线式印迹或“十十”字型排列印迹。

所述保护膜覆盖在样品垫、金标抗体结合垫和吸水垫上，在样品垫与金标抗体结合垫交界处对应的保护膜上偏向样品垫一侧0.3-0.6 cm处印制有样品标记线。

所述偶联铬离子的载体蛋白溶液是由以下方法制备的：