[发明专利]一种用于预测干扰素治疗慢性HBV疗效的微小核糖核酸及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种用于预测干扰素治疗慢性HBV疗效的微小核糖核酸及其应用。 

背景技术

乙型肝炎是一种呈世界性分布、危害严重的传染病。据世界性卫生组织报道，全球约20亿人曾感染过乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV），其中3.5亿人为慢性感染者，每年约有100万人死于HBV感染所致肝衰竭、肝硬化和原发性肝癌（HCC）。我国现有的慢性HBV感染者约9300万人，其中有症状需要治疗的活动性乙型肝炎患者约为2000多万。加之HBV的传染性强，治疗乙肝无疑是十分重要的。 

目前治疗慢性乙肝的抗病毒疗法主要依靠两种药物：α干扰素和核苷类似物类药物。干扰素(interferon,IFN)是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增长和免疫调节作用的细胞因子。然而，和许多其他药物一样，α干扰素的疗效并不是对于所有病患的疗效都非常理想。由于干扰素在治疗过程中常常伴随着发热、寒战、头痛、肌肉酸痛和乏力等不良反应，如果有一种有效方便的方法能够在病人用药之前就对其疗效进行预测，那将是慢性乙肝病人的一大福音。临床上主要用短期用药后乙肝表面抗原(HBsAg)与HBV-DNA相结合的方法来观察干扰素对乙肝病人的疗效。但HBsAg与HBV-DNA的检测依然避免不了短时间的用药，病人仍然需要一个短期的干扰素试验过程。并且，该方法的特异性和灵敏度明显偏低，对干扰素药物的疗效预测并没有很大帮助。 

综上所述，我国慢性乙肝患者数目众多，且该病传染性强，而干扰素作为一种经典抗病毒药物，其治疗周期长，副作用明显，且统计显示干扰素对部分乙肝病人无效。因此，寻找一种预测干扰素疗效的有效方便的生物标志物能够避免错过无效人群的最佳治疗时期，从而提高慢性乙肝的治愈率，对指导临床慢性乙肝的个体化治疗有着重要意义。 

微小核糖核酸（microRNA，miRNA)是近年的一个研究热点,它是一类长约19-23个核苷酸的单链RNA分子，位于基因组非编码区，进化上高度保守，可在翻译水平对基因表达进行调节，并与动物的许多正常生理活动及许多疾病的发生及发展存在着紧密的联系。近来研 究表明血清/血浆微小核糖核酸可以用于多种癌症的前期诊断和治疗指导，但还没有关于血清/血浆微小核糖核酸用于预测干扰素治疗慢性乙型病毒性肝炎病人疗效的报道。 

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种用于预测干扰素治疗慢性乙型病毒性肝炎病人疗效的血清中巨细胞病毒源的miRNA。 

本发明的另一目的是提供一种用于预测干扰素治疗慢性乙型病毒性肝炎病人疗效的TaqMan探针。 

本发明的又一目的是提供所述miRNA和TaqMan探针的应用。 

本发明的目的可通过如下技术方案实现： 

一种血清miRNA组合，该miRNA组合主要由人巨细胞病毒源的hcmv-mir-US4和hcmv-mir-UL148D两种成熟体miRNA组成，或者由hcmv-mir-US4和hcmv-mir-UL148D及hsa-miR-16三种hcmv-miR-US4miRNA组成。所述的hcmv-mir-US4序列如SEQ ID NO.1所示，所述的hcmv-mir-UL148D序列如SEQ ID NO.2所示，所述的hsa-miR-16序列如SEQ ID NO.3所示。 

一种用于预测干扰素治疗慢性乙型病毒性肝炎病人疗效的TaqMan探针组合物，由hcmv-mir-US4的TaqMan探针和hcmv-mir-UL148D的TaqMan探针组成；或者由hcmv-mir-US4的TaqMan探针、hcmv-mir-UL148D的TaqMan探针以及hsa-miR-16的TaqMan探针组成。 

所述的TaqMan探针组合物，所述的hcmv-mir-US4的TaqMan探针优选为ABI公司生产的货号为197236的TaqMan探针，或者SEQ ID NO.4所示的TaqMan探针；hcmv-mir-UL148D的TaqMan探针优选为ABI公司生产的货号为197215的TaqMan探针，或者SEQ ID NO.5所示的TaqMan探针；hsa-miR-16的TaqMan探针优选为ABI公司生产的货号为000391的TaqMan探针，或者SEQ ID NO.6所示的TaqMan探针。 

本发明所述的血清miRNA组合在制备预测干扰素治疗慢性乙型病毒性肝炎病人疗效的试剂或工具中的应用。