[发明专利]基于聚乙二醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法

权利要求书

1.一种基于聚乙二醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，包括：

（1）将叶酸FA溶于溶剂中，加入N-羟基琥珀酰亚胺NHS及碳二亚胺EDC，再加入氨基聚乙二醇羧酸NH₂-PEG-COOH，然后在25-28℃条件下，搅拌反应2-3d，透析，冻干，再复溶于溶剂中，加入N-羟基琥珀酰亚胺NHS和碳二亚胺EDC，再加入聚乙烯亚胺PEI，在25-28℃条件下，搅拌反应2-3d，透析，冻干，得到PEI-PEG-FA聚合物；其中投料摩尔比PEI：PEG：FA=1：22：15；

（2）将聚乳酸羟基乙酸共聚物PLGA溶于有机溶剂中得到油相；将盐酸阿霉素DOX·HCl溶于超纯水中，得到水相；然后将油相和水相混合，在冰水浴中超声处理20-30s，得到油包水W/O乳液；其中PLGA与DOX·HCl的质量比为100：1；油相和水相的体积比为5-10:1；

（3）将上述W/O乳液加入聚乙烯醇PVA水溶液中，冰水浴条件下进行均质化，得到水包油包水W/O/W乳液；其中W/O/W乳液三相体积比为25-100：5-10：1；

（4）将上述W/O/W乳液加入异丙醇水溶液中，搅拌1-4h，离心洗涤，得到PLGA-DOX载药空心微囊；其中W/O/W乳液和异丙醇水溶液的体积比为1:50-100；

（5）将上述PLGA-DOX载药空心微囊分散于水中，加入PEI-PEG-FA聚合物水溶液，搅拌15-30min，离心洗涤，分散在水中，冷冻干燥，得到基于聚乙二醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊；其中PLGA-DOX载药空心微囊与PEI-PEG-FA质量比为1-4：1。

2.根据权利要求1所述的一种基于聚乙二醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微球的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中溶剂均为二甲基亚砜中DMSO；产物PEI-PEG-FA分子个数比为1：15：6；PEI分子量为25000，PEG分子量为2000。

3.根据权利要求1所述的一种基于聚乙二醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中PLGA的分子量Mw为20000-40000，PLGA的有机溶剂为二氯甲烷CH₂Cl₂，PLGA溶液的浓度为0.0500mg/L；DOX·HCl水溶液的浓度为5mg/mL。

4.根据权利要求1所述的一种基于聚乙二醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中超声处理为细胞破碎仪超声处理。

5.根据权利要求1所述的一种基于聚乙烯醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中PVA的分子量Mw为20000，PVA溶液的质量百分浓度为2%-5%。

6.根据权利要求1所述的一种基于聚乙烯醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中均质化为均质机剪切，转速为9500rpm，时间为5-10min。

7.根据权利要求1所述的一种基于聚乙烯醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中离心洗涤为离心转速为3000-3500rpm，离心3-5min，弃去上清液，离心残留物用超纯水水洗，重复3-5次至离心液澄清无色。

8.根据权利要求1所述的一种基于聚乙烯醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中PEI-PEG-FA聚合物水溶液的浓度为0.25mg/ml-0.5mg/ml。

9.根据权利要求1所述的一种基于聚乙烯醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中冷冻干燥温度为-50～-80℃，时间为12-20h。

10.根据权利要求1所述的一种基于聚乙烯醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中所得的基于聚乙二醇及叶酸接枝的聚乙烯亚胺改性的PLGA载药空心微囊用于药物缓释及癌细胞靶向治疗。