[发明专利]联合检测人PGI蛋白和人PGII蛋白的荧光免疫层析试纸及制法

权利要求书

1.一种用于联合定量检测待测物中人PGI蛋白和人PGII蛋白的荧光免疫层析试纸，该试纸通过双抗体夹心法分别检测所述人PGI蛋白和所述人PGII蛋白，其中：

(a)针对所述人PGI蛋白，所述双抗体夹心法采用标记有荧光微球的第一PGI单克隆抗体作为捕获抗体，所述第一PGI单克隆抗体来源于人PGI抗原表位肽(1)和(2)中的一者；并且

所述双抗体夹心法采用第二PGI单克隆抗体作为检测抗体，所述第二PGI单克隆抗体来源于人PGI抗原表位肽(1)和(2)中的另一者；

所述人PGI抗原表位肽(1)和(2)分别为：

(1)Tyr-Lys-Val-Pro-Leu-Ile-Arg-Lys-Lys-Ser-Leu-Arg-Arg；

(2)Tyr-Lys-Asn-Phe-Thr-Val-Phe-Asp-Arg-Ala-Asn-Asn-Gln；并且

(b)针对所述人PGII蛋白，所述双抗体夹心法采用标记有荧光微球的第一PGII单克隆抗体作为捕获抗体，所述第一PGII单克隆抗体来源于人PGII抗原表位肽(3)和(4)中的一者；并且

所述双抗体夹心法采用第二PGII单克隆抗体作为检测抗体，所述第二PGII单克隆抗体来源于人PGII抗原表位肽(3)和(4)中的另一者；

所述人PGII抗原表位肽(3)和(4)分别为：

(3)Lys-Lys-Phe-Lys-Ser-Ile-Arg-Glu-Thr-Tyr；

(4)Tyr-Thr-Pro-Ser-Arg-Ala-Ala-Pro-Pro-Ser-Ser-Thr-Leu-Gln-Leu-Pro-Glu-Lys。

2.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸，其中所述第一PGI单克隆抗体是由第一PGI抗原制备而成的，该第一PGI抗原是通过使所述人PGI抗原表位肽(1)和(2)中的一者与载体蛋白偶联制备而成的；并且

所述第二PGI单克隆抗体是由第二PGI抗原制备而成的，该第二PGI抗原是通过使所述人PGI抗原表位肽(1)和(2)中的另一者与载体蛋白偶联制备而成的。

3.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸，其中所述第一PGII单克隆抗体是由第一PGII抗原制备而成的，该第一PGII抗原是通过使所述人PGII抗原表位肽(3)和(4)中的一者与载体蛋白偶联制备而成的；并且

所述第二PGII单克隆抗体是由第二PGII抗原制备而成的，该第二PGII抗原是通过使所述人PGII抗原表位肽(3)和(4)中的另一者与载体蛋白偶联制备而成的。

4.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸，其中所述荧光微球的粒径为320nm至400nm。

5.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸，其中所述荧光微球上的荧光物质为异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明或X-罗丹明，其中优选为X-罗丹明；所述荧光微球的微球材料为聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯或甲基丙烯酸甲酯的共聚物。

6.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸，其中所述荧光微球的激发波长为350～600nm，优选为390nm；发射波长为500～700nm，优选为615nm。

7.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸，其中所述试纸具有底板，并且在该底板上沿使用时的层析方向依次以接触方式设置有：样品垫、结合垫、反应膜、吸水滤纸，所述结合垫包被有所述的标记有荧光微球的第一PGI单克隆抗体和所述的标记有荧光微球的第一PGII单克隆抗体，所述反应膜包括第一检测区、第二检测区和质控区，所述第一检测区包被有所述第二PGI单克隆抗体和所述第二PGII单克隆抗体中的一者，所述第二检测区包被有所述第二PGI单克隆抗体和所述第二PGII单克隆抗体中的另一者，所述质控区包被有能与所述的标记有荧光微球的第一PGI单克隆抗体和所述的标记有荧光微球的第一PGII单克隆抗体均特异性结合的抗抗体。

8.根据权利要求7所述的荧光免疫层析试纸，其中所述反应膜为在大于550nm的波长下基本上不发荧光的硝酸纤维素膜。

9.根据权利要求7所述的荧光免疫层析试纸，其中所述底板基本上不具有荧光性质。