[发明专利]布劳特菌AUH-JLD56及其在牛蒡苷元转化中的应用有效

专利信息
申请号: 201310368975.5 申请日: 2013-08-22
公开(公告)号: CN103509741A 公开(公告)日: 2014-01-15
发明(设计)人: 王秀伶;刘明月;于秀梅 申请(专利权)人: 河北农业大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P17/04;C12R1/01
代理公司: 石家庄国为知识产权事务所 13120 代理人: 米文智
地址: 071001 *** 国省代码: 河北;13
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摘要:
搜索关键词: 布劳特菌 auh jld56 及其 牛蒡 转化 中的 应用
【权利要求书】:

1.一种布劳特菌(Blautia sp.)AUH-JLD56,保藏号为CGMCC No.8032。

2.根据权利要求1所述的布劳特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元转化中的应用,其特征在于包括下述步骤:

(1)菌株AUH-JLD56的培养;

(2)底物牛蒡苷元粗品与菌株AUH-JLD56共培养;

(3)代谢产物的分离纯化。

3.根据权利要求2所述的布劳特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元转化中的应用,其特征在于所述菌株AUH-JLD56的培养方法为:将低温冷冻保存的菌株AUH-JLD56融化并按15-20%接种量接种到盛有新鲜BHI液体培养基的试管中,在厌氧工作站内37℃下培养18-24小时;再以10-15%接种量将试管中的菌株AUH-JLD56重新转接到盛有新鲜BHI液体培养基中,继续在厌氧工作站内培养18-24小时作为种子液。

4.根据权利要求2所述的布劳特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元转化中的应用,其特征在于所述底物牛蒡苷元粗品与菌株AUH-JLD56共培养方法为:将菌株AUH-JLD56的种子液按10-15%接种量转接到BHI液体培养基中培养,然后加入牛蒡苷元粗品,使得牛蒡苷元在培养基中的浓度不超过3.0毫摩尔/升, 在厌氧工作站内培养2~3天,即可将底物牛蒡苷元粗品高效转化为3′-去甲基-牛蒡苷元。

5.根据权利要求4所述的布劳特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元转化中的应用,其特征在于所述牛蒡苷元粗品中底物牛蒡苷元浓度为150-250毫摩尔/升。

6.根据权利要求2所述的布劳特菌AUH-JLD56在牛蒡苷元转化中的应用,其特征在于所述代谢产物的分离纯化方法为:用等体积的乙酸乙酯将三角瓶内培养物萃取2次,萃取液过滤后蒸干,加入100%甲醇溶液,用制备柱在HPLC上进行分离制备3′-去甲基-牛蒡苷元。

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