[发明专利]一种耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY及其基因和应用有效
| 申请号： | 201310362292.9 | 申请日： | 2013-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN103509768A | 公开（公告）日： | 2014-01-15 |
| 发明（设计）人： | 张慧君;王俊峰;王菲菲 | 申请（专利权）人： | 江苏奕农生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/30 | 分类号： | C12N9/30;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 223600 江苏省宿*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 耐酸 真菌 淀粉酶 taamy 及其 基因 应用 | ||
1.一种耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY，其特征在于，编码权利要求1所述的耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY。
3.根据权利要求2所述的耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.包含权利要求2或3所述耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY的重组载体。
5.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体为NTaAMY-pPICzαA。
6.包含权利要求2或3所述耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY的重组菌株。
7.一种制备耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）用权利要求4所述的重组载体NTaAMY-pPICzαA转化宿主细胞，获得重组菌株；
2）培养重组菌株，诱导新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的表达；以及
3）回收并纯化所表达的新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY。
8.根据权利要求7所述的制备耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的方法，其特征在于，在步骤2）中，培养重组菌株的发酵过程分3个阶段：
第一阶段为菌体培养阶段，流加已灭菌的2L50%的葡萄糖或甘油，培养20-24小时，流加葡萄糖或甘油完后结束；
第二阶段为饥饿阶段，葡萄糖或甘油流加完之后，当溶氧上升至80%以上、pH上升即表明该阶段结束，为期30-60min；
第三阶段为诱导表达阶段，流加诱导培养基，并且保持溶氧在20%以上，培养时间在170～190小时。
9.权利要求1所述耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的应用。
10.或权利要求2所述耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY的应用。
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