[发明专利]制备天然糖基-1-磷酰二肽及磷酰胺化合物的新方法

说明书

技术领域

本发明属于化学合成领域，涉及磷氨米酮和塔罗肽的新型氢亚磷酸单酯合成方法及重要中间体的制备。

背景技术

天然糖肽主要包括常见的N-连接糖肽、O-连接糖肽和不常见的C-连接糖肽、S-连接糖肽、P-连接糖肽。在20世纪70至80年代，日本科学家首先从链霉菌培养液中分离得到了两种结构类似的天然磷酰糖肽类化合物—磷氨米酮和塔罗肽。研究表明磷氨米酮对嗜热菌蛋白酶有极强的抑制作用（K_i=28-32nm）。对嗜热菌蛋白酶/磷氨米酮复合物晶体结构的研究为福辛普利（一种血管紧张素转化酶的膦酸脂类抑制剂）的开发和高血压的治疗提供了重要的信息。此外，磷氨米酮对内皮素转化酶（ECE）的抑制作用为与ECE相关疾病（高血压、中风、肾衰竭等）的药物开发也提供了重要参考。塔罗肽与磷氨米酮有相似的金属蛋白酶抑制作用。另外，塔罗肽还是广谱的脱氢酶抑制剂，甚至对不含锌离子的脱氢酶也有抑制作用。

磷氨米酮作为常规生化试剂，市场需求量大，价格昂贵。但是其化学合成方法的报道非常有限。由于塔罗肽中的6-脱氧塔罗糖是一种罕见的微生物源6-脱氧吡喃糖，来源非常有限，因此塔罗肽的合成方法还从未见报道。目前，已报道的磷氨米酮及其类似物的合成方法主要有以下五种。第一种是α-L-鼠李糖-1-磷酸单酯与L-亮氨酸-L-组氨酸二肽缩合的方法（产率6%）；第二种是的二氯磷酸苯酯方法（产率6%）；第三种是通过三乙酰基-α-L-鼠李糖-1-氢亚磷酸单酯以碘单质进行氧化，原位生成磷酰吡啶双性离子中间体，进而与二肽进行偶联得到磷氨米酮前体的方法（产率44%）；第四种是利用（对甲氧基苯基）亚磷酰三酯中间体，通过一锅氧化偶联的方法得到磷氨米酮前体的方法（产率19%）；第五种是以三乙酰基-α-L-鼠李糖为原料，通过氢亚磷酸二酯中间体，经过氧化偶联和脱除保护得到磷氨米酮的方法（产率64%）。但是，以上五种方法在磷氨米酮制备中仍存在大量亟待解决的问题，例如：原料价格昂贵、产率低、纯化困难、亚磷酰化试剂需要特殊制备、易产生端位异构体等，无法满足磷酰糖肽类化合物大规模制备的实际要求。

发明内容

本发明的目的是为天然糖基-1-磷酰二肽及磷酰胺化合物的合成提供一种简便、高效的实用方法。

所述天然糖基-1-磷酰二肽及磷酰胺化合物7a-g和8a-g为其中7a-g:R₁=OH，R₂=H；8a-g:R₁=H，R₂=OH；7a和8a:R₃=7b和8b:R₃=7c和8c:R₃=7d和8d:R₃=7e和8e:R₃=7f和8f:R₃=7g和8g:R3=即如图4所示。

本发明的天然糖基-1-磷酰二肽及磷酰胺化合物的合成包括以下三个步骤及重要中间体：1）利用三氯化磷与咪唑反应得到的亚磷酸三咪唑后与三乙酰保护的鼠李糖（1）和6-脱氧塔罗糖（2）反应得到糖基-1-氢亚磷酸单酯3-4；2）用N,O-双（三甲基硅基）乙酰胺对糖基-1-氢亚磷酸单酯3-4进行硅基化得到亚磷酸三酯中间体，进而与四氯化碳/三乙胺体系反应得到糖基-1-磷酰氯中间体，最后与亮色二肽苄酯及其它氨基化合物H₂N-R偶联生成保护的糖-1-磷酰胺前体5a-g和6a-g；3）通过“一锅”氢化（钯碳氢化苄基）和去乙酰化脱除保护基，经凝胶色谱纯化得到糖-1-磷酰胺目标产物7a-g和8a-g。

反应过程具体如图1-3所示。

如图1所示，在本方法步骤一中，1-2与三氯化磷的摩尔比例为1：3至1：10，与咪唑的摩尔比例为1：18至1：50，反应溶剂为无水二氯甲烷，乙腈，乙醚，四氢呋喃，1,2-二氯乙烷，反应温度为-20℃至40℃，反应时间为0.5小时至2小时；水解过程中1-2与水的比例为1：5至1：50，反应温度为0-40℃，反应时间是5分钟至1小时。