[发明专利]南极磷虾二十八烷醇的提取及薄层层析扫描检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及南极磷虾二十八烷醇的提取及薄层层析扫描检测方法。

背景技术

二十八烷醇是一种天然存在的一元高级醇，广泛存在于植物的根、茎、叶、壳、籽仁的脂质中，存在于昆虫分泌的蜡质（如白蜡、虫胶蜡、蜂蜡等），广泛分布于动物的表皮、内脏、动物脂质(如羊毛蜡、鲸蜡、鱼卵脂质和海生甲壳动物等)。

1949年美国伊利诺斯大学Cureton博士用天然的二十八烷醇和合成二十八烷醇对动物和894名受试者进行了42个项目的试验，并取得重大进展。Cureton研究结果表明，二十八烷醇对人体具有以下作用：①增进耐力和精力；②提高反应灵敏性；③提高应激能力；④促进激素作用，减轻肌肉痛疼；⑤改善心肌功能；⑥降低收缩期血压；⑦提高机体代谢率。随后有学者对二十八烷醇的毒性进行了研究，通过急性毒性试验证实白鼠半数致死剂量LD50=18g/kg（白鼠口服），安全性比食盐高（食盐LD50=3g/kg）。

二十八烷醇在医药、化工、食品（尤其是保健品）、化妆品中应用广泛。在化妆品的主要作用是促进血液循环、提高氧输送能、提高基础代谢率，经皮肤吸收，具有细胞赋活作用，增进皮肤活化、消除皮肤皱纹，也用于口红、指甲油和护发素，对脱发症有明显医疗效果等。

南极磷虾是一种生活在南极洲水域的磷虾，以群集方式生活，是南极生态系统的关键物种，若以生物质能来说，它可能是地球上最成功的生物物种（大约有五亿吨）。蕴藏量巨大，每年可允许捕捞量为1～1.5亿吨，全世界每年实际捕捞量为10～50万吨。但因其含氟量高（2.4g/kg），不能直接作为食品食用。现捕捞后主要作为鱼饵料和提取加工成保健油。若以南极磷虾为原料，开发天然药物进行综合利用，则具有广阔的开发前景。

如果证明南极磷虾含有二十八烷醇，并对其开发利用，其经济效益、社会效益会十分显著。这之前二十八烷醇的检测多采用气相色谱、液相色谱方法，如进行结构分析，这两种方法还要结合红外色谱、紫外、质谱和核磁共振谱联合分析。气相和液相色谱检测方法花费大、时间长。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了南极磷虾二十八烷醇的提取及薄层层析扫描检测方法。

本发明提供的技术方案是：

南极磷虾二十八烷醇的提取及薄层层析扫描检测方法，具体步骤是：

1)将干南极磷虾用正己烷进行提取，过滤蒸除正己烷后，得南极磷虾虾油。

2)将虾油先用浓度为10%NaOH乙醇溶液进行水浴加热回流，后再加入石油醚萃取，萃取后的液体加入水进行分层，取出上层石油醚溶液，蒸除石油醚后得到固体二十八烷醇提取物。

3)利用三氯甲烷溶解二十八烷醇提取物和二十八烷醇标准品（Sigma公司）分别配成样品液和标准液。

4）不同质量的二十八烷醇标准液和单一质量的样品液分别点于同一块高效薄层硅胶板GF254上，加入展开剂，预平衡，后将硅胶板放入展开缸，上行展开，展距达到8㎝时取出晾干，随后染色液冲洗染色，烘干。

5)进行薄层扫描，得到二十八烷醇R_f（比移值）和峰面积积分值；由薄层色谱仪管理软件winCATS计算出标准液质量和峰面积积分值关系，根据样品液的峰面积积分值计算出样品液二十八烷醇的质量。

所述的步骤1），其中正己烷为南极磷虾的6倍质量体积，提取3次

所述的步骤2）中的浓度10%NaOH乙醇溶液、石油醚和水的体积比例为1:1:1。

所述的步骤4）中的不同浓度二十八烷醇标准液为5种质量梯度，分别为0.375ug,0.5ug,0.625ug,0.75ug,1.125ug。

所述的步骤4）中的展开剂为石油醚：乙酸乙酯：甲苯，体积比例为3～5:0.5～1.5：0.05～0.1。

所述的步骤4）中的染色液为水：溴百里酚蓝：氢氧化钠，体积质量比例为80～110ml：0.08～0.12g：0.6～0.8g。

二十八烷醇广泛存在于植物和动物体，本发明首次从南极磷虾中提取到了二十八烷醇，并对南极磷虾中二十八烷醇进行了薄层层析检测，更重要的是可用于任何一种含二十八烷醇的原材料、产品和副产品中二十八烷醇含量的检测，在二十八烷醇开发中具有广泛、重要的应用价值。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1