[发明专利]一种提取纯化下弯诺林苷E的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然植物提取技术领域，涉及一种提取纯化下弯诺林苷E的方法。

背景技术

下弯诺林苷E（Recurvoside E ），是从龙舌科(Agavaceae)下弯诺林Nolina recurvata的茎中提取分离得到的一种甾体皂苷类化合物，分子式：C₅₅H₈₆O₂₈，分子量：1195.27，分子结构式为：

下弯诺林苷E对cAMP磷酸二酯酶的IC50为119μM 。

现有技术中，尚未见制备下弯诺林苷E的生产工艺报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从下弯诺林的茎中提取纯化下弯诺林苷E的方法。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

一种提取纯化下弯诺林苷E的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）用醇类溶液对下弯诺林的茎进行微波提取，提取液回收乙醇；

2）浸膏加热水溶解，上大孔树脂柱吸附，水-乙醇洗脱，洗脱液用超滤膜超滤，纳滤膜浓缩，浓缩液干燥得浓缩物；

3）将浓缩物进行色谱分离，得高含量下弯诺林苷E。

所述步骤1）中对下弯诺林的茎进行粉碎处理，控制粒径为40-60目。

所述步骤1）中醇类溶液为70-90%乙醇水溶液，优选75%乙醇水溶液。

所述步骤1）中固液体积比为1:8-1:13，优选1:12。

所述步骤1）中微波功率为800-1000W，提取2-3次，每次20-40min。

所述步骤2）中大孔树脂可选AB-8、D101、HZ818和HZ830中一种。

所述步骤2）中洗脱剂为3-5BV水→3-5BV20-40%乙醇→5-7BV75-85%乙醇。

所述步骤2）中超滤膜为截留分子量3000-10000的中空复合膜，纳滤膜为截留分子量300-500的中空复合膜，进口压力控制0.5-0.9Mpa。

所述步骤3）中色谱分离采用高速逆流色谱进行，其两相溶剂系统为氯仿-甲醇-水，体积比为（11-15）：（5-8）：（4-9），所述高速逆流色谱仪转速为850-1000rpm，流动相流速为3-5ml/min。

本发明的优势在于以下弯诺林的茎为原料，成本低；采用微波提取，提取时间短、提取效率高，采用的溶剂均为易回收、无毒或低毒的有机溶剂；采用大孔树脂柱层析富集纯化，有效除去多种杂质，减轻了后面工序的工作量；采用高速逆流色谱分离效果好，产品纯度高。

具体实施方式：

实施例1：

取下弯诺林的茎粉碎至60目，称取500g投入微波萃取罐，加入6kg75%乙醇溶液微波提取40min，功率800W，放出提取液，再加入75%乙醇提取2次，合并三次提取液，用旋转蒸发仪回收乙醇至少量，加入AB-8型大孔树脂柱层析（柱径高比1:12），依次用5BV水→3BV40%乙醇→5BV75%乙醇洗脱，高效液相色谱监测，收集流分，洗脱液加入截留分子量5000的中空复合膜超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量300中空复合纳滤膜浓缩，进口压力控制0.5-0.7Mpa，得浓缩液，将浓缩液低温干燥得浓缩物；取氯仿-甲醇-水（11:5:7）置于分液漏斗中混合均匀，取上相为固定相，下相为流动相，取上述浓缩物溶于流动相中备用，开启高速逆流色谱仪，设定流动相流速为3.0ml/min，同时开启主机电机，自流动相流出时开始进样，转速控制为950rpm，通过检测器收集下弯诺林苷E流分，浓缩并干燥得下弯诺林苷E，高效液相检测含量为96.8%。

 

实施例2：