[发明专利]一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种发酵方法，尤其涉及一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法以及发酵产物。

背景技术

由于目前饲料中添加抗生素的现象十分普遍，出于安全原因，许多国家禁止利用一些畜产品下脚料生产的肉骨粉等动物蛋白原料用于饲料，因此，从安全与成本角度考虑，将植物源蛋白作为动物蛋白原料的替代品已经成为一种趋势。但是，要高效利用植物源蛋白，需要解决影响消化吸收的抗营养因子、适口性等问题；同时在幼禽畜养殖防治下痢中，抗生素的使用严重威胁了我们的食品安全，因此，在饲料生产中，需要采用在功能上能够替代不良副作用添加剂的微生态添加剂产品。

发酵豆粕作为优质的生物发酵蛋白原料，在动物饲料中可部分或完全替代动物蛋白原料，且具有来源丰富、质量稳定、易保存和无动物源性饲料疫病传染的风险等特点，在动物饲料生产中已被广泛应用。例如CN20090916A公开了一种高效发酵剂进行豆粕发酵的工艺，高效豆粕发酵剂由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌、酿酒酵母和产朊假丝酵母混合而成，将豆粕和玉米粉碎，菌种活化，将粉碎好的豆粕与发酵液用混合机混合均匀，将混合好的豆粕发酵装袋，进行发酵。该工艺消除或显著降低了豆粕中的抗营养因子的含量，能满足幼年动物健康成长，营养平衡，质优价廉的安全植物性蛋白饲料，能替代骨粉、鱼粉等动物性蛋自饲料。

然而传统固态发酵复合菌固态发酵过程中，多菌种同时接种无法同时满足不同菌发酵要求，造成发酵不彻底。多菌种组合固态整体发酵的关键控制点在于把握和控制好好氧与厌氧二个阶段，掌握好好氧向厌氧的转换。

发明内容

本发明的目的在于克服上述不足，提供一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法，通过二次接种分时段发酵，满足好氧菌与厌氧菌的不同需求，发酵彻底。

本发明的第一个方面是提供一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法，包括以下步骤：

步骤1，将枯草芽孢杆菌液、假丝酵母菌液和乳酸杆菌液混合得到混合菌液；

步骤2，将混合菌液接入到去皮豆粕，混合，通风发酵；

步骤3，将乳酸杆菌液接入到步骤2处理得到的发酵物中，混合，厌氧发酵，得到发酵豆粕。

步骤1得到混合菌液中枯草芽孢杆菌、假丝酵母菌、乳酸杆菌的比例优选为（1-5）:（1-5）:1，更优选为（2-3）:（2-3）:1，更优选为（2.2-2.8）:（2.2-2.8）:1，更优选为（2.4-2.6）:（2.4-2.6）:1。

步骤2中，混合菌液接入到去皮豆粕中的接种量为体积百分比0.5-15%，更优选为1-10%，更优选为1-5%，更优选2-4%。

步骤2中，发酵时间优选为10-40h，更优选为15-30h，更优选为18-25h，更优选为20-22h。

步骤3中，乳酸杆菌液接入到步骤2处理得到的发酵物中的接种量为体积百分比0.1-10%，更优选为0.5-8%，更优选为1-6%，更优选为1.5-4%，例如2%、2.5%、3%或3.5%。

步骤3中，厌氧发酵时间优选为为30-100h，更优选为35-80h，更优选为40-65h，更优选为45-50h，更优选为48-50h。

在本发明第一个方面的一个优选的实施例中，采用链带式发酵床进行发酵。

优选地，步骤2为：将混合菌液与去皮豆粕混合得到发酵基础料，将发酵基础料按10-50cm（优选20-45cm，更优选30-40cm）的厚度均匀摊铺在独立封闭的发酵床，起始温度控制在15-45℃（优选20-38℃，更优选20-30℃，更优选20-25℃），起始pH值为6.0-7.0（优选6.5-7.0），在链带式发酵床的第一层通风发酵。

优选地，步骤3为：将链带式发酵床由第一层发到第二层的同时，将乳酸杆菌液均匀喷洒在步骤2处理得到的发酵物上，厌氧发酵25-60h（优选30-45h，更优选36-38h）后，再将发酵物由第二层翻到第三层，继续厌氧发酵。

优选地，步骤3中链带式发酵床的第二层和第三层与周围环境隔离，通过枯草芽孢杆菌和假丝酵母菌的发酵将环境调节到适合乳酸杆菌生长的条件。

所述枯草芽孢杆菌液制备优选为：将枯草芽孢杆菌保存菌种接种到NB培养基中，活化培养8-30h（更优选10-25h，更优选12-20h，更优选14-18h），将活化培养物以0.5-10%（更优选0.8-8%，更优选1-5%，更优选2-4%）的接种量接种于种子罐中，培养10-40h（更优选12-35h，更优选14-30h，更优选16-20h），得到枯草芽孢杆菌液。