[发明专利]一株黄绿木霉菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株黄绿木霉菌及其应用。

背景技术

木霉属(Trichoderma spp.)真菌，属双核菌门、半知菌亚门、丝孢纲、丛梗孢目、从梗孢科，是一类分布广泛的生防益菌。根据Bisset系统，木霉可以分为31个种，最常见的木霉种类有哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、康宁木霉(Trichoderma koningii)、绿色木霉(Trichoderma viride)、长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)等。木霉菌在自然界分布广泛，是土壤微生物的重要组成部分，富含有机质的土壤、腐烂的木材、植物根际等均是其良好的栖息场所。近年来人们发现，木霉不仅对植物病原菌具有拮抗效应，还可在植物根部定殖并成为植物共生体，促进植物根系发育及植株生长，提高植物抗非生物胁迫的能力。磷是植物必需三大营养元素之一，能够促进植物根系发育，提高光合作用速率，增强植物的耐盐性，但土壤中缺乏有效磷。

磷是植物生长发育的必需元素之一，是植物体内核酸及多种酶辅酶、ATP等的重要组成成分，并参与光合作用，呼吸作用等多种生理代谢途径。磷还可以提高植物的抗性，促进植物在逆境中的生长发育。有研究称在盐胁迫条件下施加磷能缓解盐胁迫对莴苣的伤害，促进植物对矿质元素和水分的吸收。但土壤中可供植物直接利用的有效磷含量很少，土壤中的磷多以不溶性的磷酸盐的形式存在。利用前文分离的具有很高的溶磷能力的黄绿木霉L进行盆栽实验，全面测定盐胁迫下黄绿木霉L对黄瓜表型、生理生化以及光合作用的影响，确定了黄绿木霉L的解盐促生能力。虽然有研究表明木霉具有解盐促生作用，但是关于木霉解盐促生的机制研究还很少。因此，若能深入了解木霉菌可能的解盐促生机制，并以此有目标地筛选多功能木霉菌，将有利于当今绿色农业生产发展，具有重要的理论及实践意义。由于筛选的黄绿木霉L有很高的溶磷能力以及解盐促生作用，所以通过水培实验表明了黄绿木霉L的溶磷作用在解盐促生中的作用。由于溶磷微生物种类繁多，而且不同菌株的溶磷机制也不相同，因此利用高效液相测定黄绿木霉发酵液有机酸的种类以初步探究木霉菌溶解难溶性无机磷的机制，这对进一步确定溶磷作用在黄绿木霉L解盐促生中的作用具有重要意义。

发明内容

一株产生IAA和嗜铁素且具有高溶磷特性的黄绿木霉菌(Trichoderma aureoviride)，其特征在于在缓解盐胁迫对黄瓜幼苗生长的影响。

菌株能够缓解盐胁迫对黄瓜幼苗生长的影响，提高盐胁迫下黄瓜幼苗叶绿素、可溶性糖以及可溶性蛋白的含量、降低MDA的含量。

利用所述的黄绿木霉菌对盐胁迫下黄瓜的促生作用，其特征在于，包括以下步骤：对基质土灭菌后进行育苗，待种子萌发并长出两片子叶后，选取生长状态一致的黄瓜幼苗按下表进行盆栽试验，20天后称取新鲜黄瓜叶片0.5g，测定叶片磷含量、叶绿素、MDA、可溶性糖及可溶性蛋白含量。在有无盐胁迫下接种黄绿木霉L的黄瓜株高、叶片的叶绿素、MDA、可溶性糖、可溶性蛋白含量均比对照显著提高，叶片磷含量比未接菌的对照组分别提高了23％和35.7％。

水培实验表明，菌株的溶磷能力是其解盐促生机制之一。测定了黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)L对土壤中常见的三种不溶性无机磷，即磷酸氢钙、磷酸钙以及磷酸铁的转化能力，结果表明，黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)L能够溶解磷酸氢钙以及磷酸钙，但不能溶解磷酸铁，200mmol/L盐胁迫对菌株生长的影响及磷酸氢钙溶解能力的降低大体相当。鉴于黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)L发酵液对磷酸氢钙有较强的溶解能力，采用含60mmol l^-1NaCl的无菌水对黄瓜幼苗进行盐胁迫，研究黄绿木霉L的溶磷特性对盐胁迫下植株生长的影响。具体步骤如下：基质土灭菌后进行育苗，待种子萌发并长出两片子叶后，选取生长状态一致的黄瓜幼苗按下表进行水培试验，设置添加木霉发酵液和磷酸氢钙(CF+P)、只添加磷酸氢钙(Non-CF+P)、只添加木霉菌发酵液(CF-P)以及只添加无菌水(Non-CF-P)四个处理。每个处理水培液总体积为80mL，每个处理5个重复4株苗，室温培养，期间定期添加无菌水以保证水培液总体积恒定，黄瓜培养7d后收获、拍照，测定幼苗植株茎长、根长、茎与叶鲜重、根鲜重。