[发明专利]一种新型内切木聚糖酶及其编码基因和应用有效
申请号: | 201310357541.5 | 申请日: | 2013-08-15 |
公开(公告)号: | CN104371988B | 公开(公告)日: | 2018-09-28 |
发明(设计)人: | 周志华;王钱福;钱昌丽;刘宁;严兴;魏维;王倩;谢磊;黄勇平 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12P19/14;C12P19/00;C12P19/02;C12P19/12;C12Q1/34;A23L33/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 韦东 |
地址: | 200031 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 木聚糖酶 编码基因 内切木聚糖酶 热稳定性 应用 温度稳定性 表达载体 宿主细胞 简单糖 酶活性 突变体 | ||
1.一种分离的多肽,其特征在于,该多肽选自下组:
(a)如SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的多肽;
(b)SEQ ID NO:2的多肽片段,该多肽片段至少含SEQ ID NO:2第19-267位氨基酸残基;
(c)(a)或(b)所述的多肽在选自K32、N37、S42、M80、K205、E219、A221、M222、K223、T228和A386位点中的1个、2个或3个位点上发生了氨基酸取代且仍具有多肽(a)功能的多肽,其中,所述氨基酸取代选自:K32T、N37D、S42N、M80I、K205E、E219D、A221T、M222L、K223M、K223T、K223C、K223S、K223G、K223L、T228S和A386S,所述功能包括作为内切木聚糖酶的功能和任选的相对于野生型序列而言提高的热稳定性;和
(d)在(a)、(b)或(c)所述多肽的N或C末端添加标签序列,或在其N末端添加信号肽序列后形成的多肽。
2.如权利要求1所述的多肽,其特征在于,(c)项所述的多肽为在选自K32、K205、K223和A386的位点中的1个、2个或3个位点上发生了氨基酸取代且仍具有多肽(a)功能的多肽,其中,所述氨基酸取代选自:K32T、K205E、K223M、K223T、K223C、K223S、K223G、K223L和A386S。
3.如权利要求1所述的多肽,其特征在于,(c)项所述多肽为至少在K223位发生了选自以下的氨基酸取代的多肽:K223M、K223T、K223C、K223S、K223G和K223L。
4.如权利要求1所述的多肽,其特征在于,(c)项所述多肽为在K32和K223中发生了氨基酸取代的多肽,其中,所述氨基酸取代为K32T与选自K223M、K223T、K223C、K223S、K223G和K223L中的任一种突变的组合。
5.如权利要求1所述的多肽,其特征在于,所述多肽选自:
(1)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K32T;
(2)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:N37D;
(3)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:S42N;
(4)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:M80I;
(5)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K205E;
(6)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:E219D;
(7)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:A221T;
(8)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:M222L;
(9)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K223M;
(10)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K223T;
(11)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K223C;
(12)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K223S;
(13)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K223G;
(14)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K223L;
(15)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:T228S;
(16)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:A386S;
(17)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K205E、K223T和A386S;
(18)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K32T和K223T;
(19)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K32T和K223C;
(20)在对应于SEQ ID NO:2的下述位置上发生了如下所述取代的多肽:K32T和K223S;
(21)由SEQ ID NO:2的第19-272位氨基酸残基组成的多肽片段;和
(22)由SEQ ID NO:2的第19-267位氨基酸残基组成的多肽片段。
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