[发明专利]一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用

权利要求书

1.一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用，其特征在于：将假单胞菌(Pseudomonas sp.)CGMCC No.6823、不动杆菌(Acinetobacter sp.)CGMCC No.6824、博德特氏菌(Bordetella sp)CGMCC No.6825、克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)CGMCC No.6826、巨大芽孢杆菌(Bacillus magterium)CGMCC No.5225和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC No.5224复合菌扩大培养于培养基中用于制备处理焦化废水的菌剂进而去除焦化废水中的污染物；

培养处理焦化废水所用复合菌扩大培养的培养基为Ⅱ号培养基；

其中Ⅱ号培养基成分为每升含有蔗糖8-12g，可溶性淀粉12-17g，甘油3-7g，鱼粉1-3g，尿素6-10g，(NH₄)₂SO₄ 1-3g，NaCl 2-4g，K₂HPO₄2-4g，KH₂PO₄ 0.5-2g，pH6.0-7.5；

所述复合菌按数量百分比计，假单胞菌含量45％-50％，不动杆菌含量10％-15％，博德特氏菌含量5％-10％，克雷伯氏菌含量5％-10％，巨大芽孢杆菌5％-10％，枯草芽孢杆菌5％-10％。

2.按权利要求1所述的培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用，其特征在于：Ⅱ号培养基成分为每升含有蔗糖10g，可溶性淀粉15g，甘油5g，鱼粉2g，尿素8g，(NH₄)₂SO₄ 2g，NaCl 3g，K₂HPO₄ 3.5g，KH₂PO₄1.5g，pH 7.0。

3.按权利要求1所述的培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用，其特征在于：所述复合菌按数量百分比计，假单胞菌含量50％，不动杆菌含量15％，博德特氏菌含量5％，克雷伯氏菌含量10％，巨大芽孢杆菌10％，枯草芽孢杆菌10％。

4.按权利要求1所述培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用，其特征在于：

1)各菌株的培养：将假单胞菌、不动杆菌、博德特氏菌、克雷伯氏菌、巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌分别接种于Ⅰ号培养基中进行培养，在120rpm/min摇床于28-32℃培养24-28h，使各菌浓度达到10⁸个/mL以上，之后将各菌株按数量百分比计，假单胞菌含量45％-50％，不动杆菌含量10％-15％，博德特氏菌含量5％-10％，克雷伯氏菌含量5％-10％，巨大芽孢杆菌5％-10％和枯草芽孢杆菌5％-10％混合；

2)复合菌放大培养：按2-5％体积比例将混合菌接种于Ⅰ号培养基中进行培养，在120rpm/min摇床于30℃培养24-28h，混合菌浓度可达到10⁹个/mL，之后再按2-5％体积比例将混合菌接种于Ⅱ号培养基中于28-32℃，pH＝7.0条件下发酵培养24-28h，使溶氧量保持在40％-60％，并加入发酵培养液量2/10000体积的消泡剂，使复合菌浓度达到10¹⁰-10¹¹个/mL；

3)菌剂的制备：将上述放大培养的菌体离心，沉淀中加入无机盐缓冲液配成菌悬液，而后与草炭土混合，即得固体菌剂；无机盐缓冲液为：KH₂PO₄ 0.9g/L，Na₂HPO₄·12H₂O 6.5g/L；

Ⅰ号培养基为:胰化蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，清水1000mL，pH 7.0，121℃灭菌20min。

5.按权利要求4所述培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用，其特征在于：所述步骤2)将Ⅱ号培养基总量的3/4质量添加到发酵罐中，将Ⅰ号培养基中放大培养的混合菌接种于Ⅱ号培养基中，进行发酵培养，培养8-12h后将剩余的培养基补入发酵罐中，继续进行发酵培养，培养过程中通入空气使培养过程中溶氧量保持在40％-60％，并添加GPES型消泡剂，添加量为培养基的2/10000体积。